粟酒裂殖酵母核糖體蛋白RPL32表達水平下降引發(fā)的無性絮凝作用及與有性絮凝作用的比較研究.pdf

1、我們實驗室之前報道過粟酒裂殖酵母核糖體蛋白RPL32-2具有潛在的轉錄因子活性。在進一步研究RPL32-2功能時，發(fā)現(xiàn)RPL32蛋白基因敲除突變體rpl32-I△突變株和rpl32-2△突變株在營養(yǎng)豐富的YEPD液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)會發(fā)生無性細胞絮凝作用，而基因回補的重組突變菌株rpl32-1△/RPL32-1突變株和rpl32-2A/RPL32-2突變株細胞絮凝作用消失。隨機敲除核糖體蛋白rpl21-2、rpl9-2基因的酵母菌株也發(fā)生細

2、胞凝絮作用，但是隨機敲除非核糖體蛋白-甘露糖磷酸化甲脒基轉移酶的編碼基因mpg、2，6-二磷酸果糖二位磷酸酶的編碼基因fbp的酵母菌株卻沒有發(fā)生細胞凝絮作用。
　　實時定量PCR結果顯示，rpl32-1△突變株和rpl32-2△突變株無性絮凝細胞內總的rpl32(rpl32-1+rpl32-2)表達水平與未敲除野生型菌株相比分別減少了35.9％和46.9％，合成的核糖體總量較野生型菌株的細胞分別下降了35.2％和43.0％。在YE

3、PM誘導培養(yǎng)基中產(chǎn)生有性絮凝的YHL6381/SP(h+/h-)細胞，和在非誘導培養(yǎng)基YEPD中未形成有性絮凝的單倍體細胞混合物相比，RPL32蛋白的表達水平在有性絮凝細胞中也下降了42.1％。
　　轉錄組學分析表明，有性絮凝細胞中，很多核糖體蛋白基因和核糖體合成蛋白基因表達水平下降，而核糖體合成抑制因子的基因表達水平上升，提示核糖體蛋白下降確實是有性絮凝作用發(fā)生的一個特征。另外無性絮凝細胞和有性絮凝細胞中都使用了因營養(yǎng)缺乏啟動有