酵母雙雜交篩選PAK4相互作用蛋白質(zhì)及PAK4與LZW2相互作用的驗(yàn)證.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任?！撐淖髡吆灻?垃 日期： 五i ￡：《

2、：- 2 ．中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容( 保密內(nèi)容除外) ，以采用影印、縮印

3、或其他手段保存論文。論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日 期：酵母雙雜交篩選P A K 4 相互作用蛋白質(zhì)及P A K 4 與L Z I I l 2相互作用的驗(yàn)證目的腫瘤是世界范圍內(nèi)人類疾病，而乳腺癌作為女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率近年來(lái)持續(xù)上升，而且乳腺癌的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)常常是患者最常見(jiàn)的死亡原因。因此，對(duì)于乳腺癌的發(fā)病機(jī)制及治療研究成為我國(guó)目前對(duì)其研究的一個(gè)重要課題。P 2 1 活化激酶( P 2 1 ．a(chǎn) c t i v a t e

4、d k i n a s cP ：A K ) 是一類進(jìn)化上保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，為R h o 家族小鳥(niǎo)苷三磷酸酶( R h o ．G T P a s c ) 、C d c 4 2 ／R a c 下游靶蛋白，參與許多重要細(xì)胞活動(dòng)。到目前為止P A K 家族共有6 個(gè)成員，皆含有氨基末端( N ．末端) 調(diào)節(jié)區(qū)和羧基末端( C ．末端) 激酶區(qū)。根據(jù)其結(jié)構(gòu)相似性。將它們分為兩類，I 類包括P A K l 、P A K 2 和P A K

5、 3 ，I I 類包括P A K 4 、P A K 5 和P A K 6 。兩類P A K在結(jié)構(gòu)、活化方式、生物學(xué)功能上有著很大的區(qū)別，它們具有不同的下游靶蛋白。P A K 4 定位于1 9 號(hào)染色體，是目前研究最廣泛的I I 類P A K ，其在許多生物學(xué)活動(dòng)如細(xì)胞骨架重排、細(xì)胞遷移、細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。鑒于P A K 4 在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的重要作用，本實(shí)驗(yàn)利用酵母雙雜交技術(shù)從人胎腦e D N A 文庫(kù)中篩選出了若干個(gè)P A

6、 K 4 新的相互作用蛋白，并選取了一個(gè)較為感興趣的蛋白L Z W 2 ，驗(yàn)證二者在體內(nèi)外的相互作用，并驗(yàn)證L Z W 2 與E S C R T - I I I 復(fù)合體成員的互作。L Z W 2 為U S P ( u b i q u i t i n ．s p e c i f i c p r o t e a s e ) 蛋白家族成員之一，此家族是一類進(jìn)化保守的去泛素化酶家族，入源U S P 共包括5 6 個(gè)成員。U S P s 通過(guò)能去除