宿主抵御病原菌入侵的新機制：病原菌效應蛋白的谷胱甘肽化修飾.pdf

1、蛋白質(zhì)的谷胱甘肽化修飾(S-glutathionylation)屬于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的一種，是指在蛋白質(zhì)的半胱氨酸殘基上引入一個谷胱甘肽(GSH，γ-Glu-Cys-Gly)的小分子基團，存在于許多細胞內(nèi)，具有抗氧化、解毒、調(diào)節(jié)細胞信號轉導和細胞增殖等重要作用。最近研究表明，其在防御病原菌入侵宿主方面也發(fā)揮著一個重要的功能，而這種作用機制目前仍是未知的?；诖藢ζ湔归_了研究，并猜測可能存在的兩種機制:一種是病原菌自身蛋白質(zhì)發(fā)生谷胱甘肽化

2、修飾，從而減弱了它入侵宿主的能力;另一種可能是宿主自身的蛋白質(zhì)發(fā)生了谷胱甘肽化修飾，從而積極地抵御病原菌的入侵。
　　在前期開展的研究中發(fā)現(xiàn),志賀氏菌的效應蛋白在體外能發(fā)生谷胱甘肽化修飾，因此將研究重點放在病原體自身蛋白質(zhì)發(fā)生谷胱甘肽化修飾。具體開展了以下研究:
　　利用谷胱甘肽化修飾的體外重組體系及質(zhì)譜實驗驗證OspF是否能在體外發(fā)生這種修飾;隨后進一步探討谷胱甘肽化修飾后的OspF，對其酶活以及與底物結合力的影響;隨后深

3、入到病原病感染哺乳動物細胞，研究OspF發(fā)生谷胱甘肽化修飾的情況。最后還對其它的病原菌效應蛋白SpvC、OspB、OspC、IpaH、YopJ等的谷胱甘肽化修飾也進行了初步探討。
　　研究結果表明:1）OspF蛋白都能夠在體外發(fā)生谷胱甘肽化修飾反應，且這種修飾受氧化還原壓力調(diào)節(jié);2）發(fā)生谷胱甘肽化修飾的OspF蛋白自身的酶活和與底物結合的能力均下降;3）志賀氏菌感染真核細胞后體內(nèi)表達的OspF確實能發(fā)生谷胱甘肽化修飾，使MAPK信