靶向含硒化合物納米體系及金屬配合物增敏化療藥物的抗腫瘤活性研究.pdf

1、全球癌癥發(fā)病率和死亡率持續(xù)升高，成為威脅世界公共衛(wèi)生的重大問題，正在成為威脅人類健康的頭號殺手。癌癥是指機體在各種致癌因素的作用下，局部組織的某一個細胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，導(dǎo)致其異常增生而形成的異常病變，于是我們通常將惡性腫瘤稱之為癌癥?，F(xiàn)在治療腫瘤的方式主要有手術(shù)治療，化療和放療，其中化療是臨床使用最多的輔助治療方式。而如今化療藥物在臨床的使用具有局限性例如化療藥物在某些生理條件下不夠穩(wěn)定，并且沒有選擇性，對正常細胞也

2、具有細胞毒性和腫瘤細胞對化療藥物的耐受性增強。本實驗室前期合成的一系列含硒化合物包括有機硒和納米硒，還有金屬類配合物被證明對多種腫瘤具有較好的抗腫瘤效果。本研究利用實驗室?guī)熜謳熃闱捌诤铣傻挠袡C硒，金屬配合物和納米硒探究抗腫瘤的活性和機制。在本研究中我們利用粒徑，電位的變化來評價藥物的穩(wěn)定性，MTT實驗測定細胞生存率，劃痕實驗和小室實驗檢測藥物對腫瘤細胞遷移和侵襲的抑制能力，通過檢測受體表達和封閉受體來檢測藥物的靶向抗腫瘤特性。機制研究通

3、過流式細胞儀分析藥物作用腫瘤細胞后腫瘤細胞周期的改變。利用熒光探針來檢測細胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和藥物在細胞內(nèi)的吸收和定位，探究藥物在誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡時細胞信號蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)。為進一步開發(fā)新的抗腫瘤的含硒化合物和金屬配合物增敏劑和低毒性的抗腫瘤藥物提供科學(xué)依據(jù)。具體研究內(nèi)容如下：
　　1.本章研究通過與靶向細胞整合素受體的RGD多肽結(jié)合PEI來負載有機硒形成納米粒子對膀胱癌細胞EJ和T24細胞的抗腫瘤效果和抗腫瘤機制，本研究發(fā)現(xiàn)最終形成的納米

4、粒子是均勻分散的殼核球狀結(jié)構(gòu)，外面的殼是由親水的RGD多肽形成的，而疏水性的有機硒則形成內(nèi)層的核。納米粒子對膀胱癌的兩種細胞具有較好的抗腫瘤效果，并且對正常細胞細胞毒性較小。藥物能抑制腫瘤細胞遷移和侵襲的能力，誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡伴隨著Caspases家族蛋白的激活。機制研究顯示藥物作用于腫瘤細胞后導(dǎo)致活性氧的升高，激活使JNK，p38磷酸化水平上升，抑制磷酸化的ERK和AKT，最終激活p53蛋白伴隨著線粒體損傷導(dǎo)致腫瘤細胞的凋亡。

5、>　　2.腫瘤細胞對于TRAIL作為一種重組人蛋白靶向抗腫瘤藥物的耐受性增強，使TRAIL這種靶向藥物的治療受到局限。尋到一種低毒有效的藥物與TRAIL協(xié)同作用增敏誘導(dǎo)細胞凋亡十分必要。本實驗室前期合成的一系列金屬配合物證明具有較好的抗腫瘤效果。我們研究4種鐵多吡啶配合物與TRAIL聯(lián)合用藥的對腦膠質(zhì)瘤的抗腫瘤效果，發(fā)現(xiàn)4種鐵配合物與TRAIL具有協(xié)同抗腫瘤效果。并且抗腫瘤的效果與4種鐵配合物的脂水分布系數(shù)有關(guān)。我們研究了4種鐵配合物本

6、身具有的跨膜能力發(fā)現(xiàn)與TRAIL協(xié)同抗腫瘤的效果有對應(yīng)性。機制研究發(fā)現(xiàn)鐵配合物與TRAIL聯(lián)合使用能提高死亡受體表達從而加強藥物通過死亡受體途徑誘導(dǎo)的細胞凋亡。
　　3.本章研究靶向尿激酶受體和腫瘤微環(huán)境的靶向納米硒對膀胱癌細胞的抗腫瘤效果。通過測定納米粒子的電位和粒徑變化衡量穩(wěn)定性。MTT和細胞克隆形成實驗發(fā)現(xiàn)經(jīng)過雙靶向修飾的納米硒具有較好的選擇性抗腫瘤的效果。通過設(shè)計模擬腫瘤微環(huán)境的實驗檢測ACCP多肽是否能靶向腫瘤微環(huán)境，結(jié)