靶向含硒化合物納米體系及金屬配合物增敏化療藥物的抗腫瘤活性研究.pdf

1、全球癌癥發(fā)病率和死亡率持續(xù)升高，成為威脅世界公共衛(wèi)生的重大問(wèn)題，正在成為威脅人類健康的頭號(hào)殺手。癌癥是指機(jī)體在各種致癌因素的作用下，局部組織的某一個(gè)細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長(zhǎng)的正常調(diào)控，導(dǎo)致其異常增生而形成的異常病變，于是我們通常將惡性腫瘤稱之為癌癥。現(xiàn)在治療腫瘤的方式主要有手術(shù)治療，化療和放療，其中化療是臨床使用最多的輔助治療方式。而如今化療藥物在臨床的使用具有局限性例如化療藥物在某些生理?xiàng)l件下不夠穩(wěn)定，并且沒(méi)有選擇性，對(duì)正常細(xì)胞也

2、具有細(xì)胞毒性和腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐受性增強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)室前期合成的一系列含硒化合物包括有機(jī)硒和納米硒，還有金屬類配合物被證明對(duì)多種腫瘤具有較好的抗腫瘤效果。本研究利用實(shí)驗(yàn)室?guī)熜謳熃闱捌诤铣傻挠袡C(jī)硒，金屬配合物和納米硒探究抗腫瘤的活性和機(jī)制。在本研究中我們利用粒徑，電位的變化來(lái)評(píng)價(jià)藥物的穩(wěn)定性，MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞生存率，劃痕實(shí)驗(yàn)和小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的抑制能力，通過(guò)檢測(cè)受體表達(dá)和封閉受體來(lái)檢測(cè)藥物的靶向抗腫瘤特性。機(jī)制研究通

3、過(guò)流式細(xì)胞儀分析藥物作用腫瘤細(xì)胞后腫瘤細(xì)胞周期的改變。利用熒光探針來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和藥物在細(xì)胞內(nèi)的吸收和定位，探究藥物在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡時(shí)細(xì)胞信號(hào)蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新的抗腫瘤的含硒化合物和金屬配合物增敏劑和低毒性的抗腫瘤藥物提供科學(xué)依據(jù)。具體研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.本章研究通過(guò)與靶向細(xì)胞整合素受體的RGD多肽結(jié)合PEI來(lái)負(fù)載有機(jī)硒形成納米粒子對(duì)膀胱癌細(xì)胞EJ和T24細(xì)胞的抗腫瘤效果和抗腫瘤機(jī)制，本研究發(fā)現(xiàn)最終形成的納米

4、粒子是均勻分散的殼核球狀結(jié)構(gòu)，外面的殼是由親水的RGD多肽形成的，而疏水性的有機(jī)硒則形成內(nèi)層的核。納米粒子對(duì)膀胱癌的兩種細(xì)胞具有較好的抗腫瘤效果，并且對(duì)正常細(xì)胞細(xì)胞毒性較小。藥物能抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的能力，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡伴隨著Caspases家族蛋白的激活。機(jī)制研究顯示藥物作用于腫瘤細(xì)胞后導(dǎo)致活性氧的升高，激活使JNK，p38磷酸化水平上升，抑制磷酸化的ERK和AKT，最終激活p53蛋白伴隨著線粒體損傷導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡。

5、>　　2.腫瘤細(xì)胞對(duì)于TRAIL作為一種重組人蛋白靶向抗腫瘤藥物的耐受性增強(qiáng)，使TRAIL這種靶向藥物的治療受到局限。尋到一種低毒有效的藥物與TRAIL協(xié)同作用增敏誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡十分必要。本實(shí)驗(yàn)室前期合成的一系列金屬配合物證明具有較好的抗腫瘤效果。我們研究4種鐵多吡啶配合物與TRAIL聯(lián)合用藥的對(duì)腦膠質(zhì)瘤的抗腫瘤效果，發(fā)現(xiàn)4種鐵配合物與TRAIL具有協(xié)同抗腫瘤效果。并且抗腫瘤的效果與4種鐵配合物的脂水分布系數(shù)有關(guān)。我們研究了4種鐵配合物本

6、身具有的跨膜能力發(fā)現(xiàn)與TRAIL協(xié)同抗腫瘤的效果有對(duì)應(yīng)性。機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)鐵配合物與TRAIL聯(lián)合使用能提高死亡受體表達(dá)從而加強(qiáng)藥物通過(guò)死亡受體途徑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。
　　3.本章研究靶向尿激酶受體和腫瘤微環(huán)境的靶向納米硒對(duì)膀胱癌細(xì)胞的抗腫瘤效果。通過(guò)測(cè)定納米粒子的電位和粒徑變化衡量穩(wěn)定性。MTT和細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)雙靶向修飾的納米硒具有較好的選擇性抗腫瘤的效果。通過(guò)設(shè)計(jì)模擬腫瘤微環(huán)境的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ACCP多肽是否能靶向腫瘤微環(huán)境，結(jié)