MiR-181a對(duì)PTZ致癇大鼠認(rèn)知功能影響的研究.pdf

1、目的：近年來(lái)microRNA調(diào)控備受關(guān)注，越來(lái)越多的研究證實(shí)miRNAs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)元分化過(guò)程扮演著重要角色。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)miRNAs與癲癇及癲癇的認(rèn)知障礙密切相關(guān)，初步研究顯示PTZ（pentylenetetrazol，戊四氮）致癇大鼠記憶障礙組miR-181a表達(dá)明顯上調(diào)，但是miR-181a是如何影響PTZ致癇大鼠的認(rèn)知功能目前尚不清楚?；谝陨涎芯勘尘?，我們?cè)O(shè)計(jì)以下實(shí)驗(yàn)對(duì)miR-181a可能的生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行初步探討。

2、
　　方法：采用SD雄性大鼠，通過(guò)PTZ腹腔注射（60mg/kg）建立癲癇模型，隨機(jī)分為癲癇對(duì)照組、干預(yù)對(duì)照組、miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組，另設(shè)正常對(duì)照組，每組各12只。28天后進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，然后處死大鼠取海馬組織，檢測(cè)海馬組織中miR-181a的表達(dá)、海馬神經(jīng)元凋亡情況。
　　結(jié)果：⑴認(rèn)知行為學(xué)研究：定位航行實(shí)驗(yàn)中，隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加，各組的逃避潛伏期逐漸縮短。miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于

3、其余組，正常對(duì)照組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均低于其余各組。在試驗(yàn)第5天，與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組潛伏期明顯延長(zhǎng)，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。癲癇對(duì)照組與干預(yù)對(duì)照組潛伏期無(wú)明顯差異（P>0.05）。miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組的潛伏期明顯高于癲癇對(duì)照組（P<0.05）。miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組與干預(yù)對(duì)照組相比無(wú)明顯差異（P>0.05）。第6天撤掉平臺(tái)進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)，與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組的穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少。癲癇對(duì)照組、干預(yù)對(duì)照組

4、和miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組的穿越平臺(tái)次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。正常對(duì)照組在目標(biāo)象限的運(yùn)動(dòng)時(shí)間比明顯高于癲癇對(duì)照組（P<0.05）。與干預(yù)對(duì)照組比較，miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組在目標(biāo)象限的運(yùn)動(dòng)時(shí)間比顯著減少（P<0.05）。⑵miR-181a agomir干預(yù)前后miR-181a基因表達(dá)：與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組miR-181a表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與干預(yù)對(duì)照組比較，miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)

5、組表達(dá)上調(diào)明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑶miR-181a agomir干預(yù)前后海馬神經(jīng)元凋亡研究：通過(guò)TUNEL檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組凋亡細(xì)胞增加，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。癲癇對(duì)照組和干預(yù)對(duì)照組凋亡細(xì)胞無(wú)明顯差異。與癲癇對(duì)照組比較，miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組凋亡細(xì)胞增加12.83％，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組與干預(yù)對(duì)照組比較，凋亡細(xì)胞增加7.67%，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

6、另外，采用Western blot檢測(cè)細(xì)胞凋亡因子Bcl-2顯示：與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。miR-181a激動(dòng)劑干預(yù)組Bcl-2蛋白表達(dá)量較干預(yù)對(duì)照組減少38.88%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　結(jié)論：①M(fèi)iR-181a對(duì)PTZ致癇大鼠的認(rèn)知功能具有負(fù)向調(diào)控作用。②MiR-181a明顯減少Bcl-2蛋白表達(dá)，顯著增加海馬神經(jīng)元凋亡，這可能是miR-181a引起致癇大鼠認(rèn)