基于Stim1-Orai1復(fù)合體探索穩(wěn)心顆?！罢{(diào)律補(bǔ)心”的鈣調(diào)控機(jī)制.pdf

1、背景：心律失?？砂l(fā)生于各年齡階段，有潛在或直接的致命性，嚴(yán)重危害人類健康。據(jù)統(tǒng)計，我國每年約有54萬人死于心源性猝死，其中90％是由惡性心律失常引起的。隨著社會老齡化、飲食習(xí)慣、社會壓力等因素的影響，發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年升高的趨勢。但現(xiàn)有治療手段有限，為了更好地預(yù)防和緩解心律失常的發(fā)生和發(fā)展，有效藥物的研究顯得迫在眉睫。
　　目的：本研究從臨床實際問題入手，運(yùn)用系統(tǒng)評價方法，評價穩(wěn)心顆粒有效性、安全性。結(jié)合心肌梗死大鼠模型考察對其對心

2、梗后心律失常的影響，并利用ELISA、RT-PCR、免疫組化、western blot等技術(shù)，探討其作用機(jī)制。
　　方法：通過系統(tǒng)檢索The Cochrane Library、EMbase、CNBI、CBM、CNKI、VIP和WangFang數(shù)據(jù)庫，收集從建庫到2015年12月所有關(guān)于穩(wěn)心顆粒聯(lián)合胺碘酮治療心衰合并室性心律失常的治療文獻(xiàn)。質(zhì)量評價參照J(rèn)adad評分標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)據(jù)分析采用Rev Man5.3軟件。在動物實驗部分，本研究采

3、用結(jié)扎左冠狀動脈前降支手術(shù)造成心梗模型；應(yīng)用全自動生化分析儀檢測術(shù)后24h,LDH、CK、CK-MB等急性心肌損傷指標(biāo)的變化，評價模型穩(wěn)定性；以地爾硫卓為陽性對照藥，取術(shù)后給藥28天血清，通過酶聯(lián)免疫吸附測定法進(jìn)行檢測NT-proBNP；在心梗后28天對大鼠進(jìn)行動物心臟超聲評價，檢測心功能的改變；應(yīng)用BL-420S生物機(jī)能實驗系統(tǒng)，監(jiān)測異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心律失常情況；取心臟并對其進(jìn)行HE染色、Masson染色、免疫組化染色等對心臟病理形

4、態(tài)變化進(jìn)行觀察；采用分子生物學(xué)方法對stim1、orai1、SERCA2相關(guān)mRNA、蛋白進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果：
　　1.最終納入12篇RCT文獻(xiàn)，研究方法學(xué)質(zhì)量均不高。結(jié)果顯示：在常規(guī)胺碘酮治療基礎(chǔ)上加用穩(wěn)心顆粒在治療心衰合并室性心律失常上具有一定的優(yōu)勢，但由于納入評價的文獻(xiàn)質(zhì)量較低，仍需要大規(guī)模、高質(zhì)量的隨機(jī)對照試驗提供更可靠證據(jù)。
　　2.結(jié)扎大鼠進(jìn)行左冠狀動脈前降支后1天，進(jìn)行心電圖、心肌酶學(xué)以及心肌NBT染色

5、檢測，結(jié)果提示大鼠出現(xiàn)典型6個病理性q波，急性心肌損傷心肌酶學(xué)指標(biāo)上升，缺血區(qū)顯著，模型復(fù)制成功；
　　3.對大鼠進(jìn)行結(jié)扎左冠狀動脈前降支術(shù)后第28d進(jìn)行心功能檢查，發(fā)現(xiàn)穩(wěn)心顆粒能夠顯著改善大鼠因心梗引發(fā)的心功能的降低；
　　4.取大鼠28d心肌，進(jìn)行病理學(xué)和免疫學(xué)染色，發(fā)現(xiàn)穩(wěn)心顆粒組大鼠能夠明顯減輕心肌纖維化，減少心肌梗死面積；
　　5.取心肌梗死邊緣區(qū)心肌組織，進(jìn)行RT-PCR，對stim1、orai1進(jìn)行基因表達(dá)