大黃素治療重癥急性胰腺炎作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:觀察大黃素對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠病情嚴(yán)重程度及各器官病理損害的影響證實(shí)其有治療重癥急性胰腺炎的作用；通過分析大黃素對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠細(xì)胞因子水平和Treg比例及功能的影響，闡釋其治療重癥急性胰腺炎的機(jī)制。
　　方法:清潔級(jí)Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為3組(n=20)：(1)假手術(shù)對(duì)照(Sham)組；(2)重癥急性胰腺炎（SAP）模型組；(3)大黃素（Emodin）治療組。采用膽胰管逆行注入5％?；悄懰徕c的方法制備大鼠SA

2、P模型，大黃素治療組在制作SAP模型后經(jīng)腹腔緩慢注射大黃素2.5mg/Kg體重，余兩組注射等量生理鹽水。術(shù)后24小時(shí)處死大鼠，運(yùn)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶、AST、ALT水平，分光光度計(jì)法檢測(cè)肺組織勻漿上清中MPO活力，計(jì)算肺濕干重比值。采用HE染色方法檢測(cè)胰腺、肺、肝器官組織病理損害程度。采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)血清中 TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1水平。采用直接免疫熒光法對(duì)CD4+和Fo

3、xp3+T淋巴細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組大鼠Treg淋巴細(xì)胞比例及 Treg/CD4+比值；實(shí)時(shí)熒光定量 PCR方法檢測(cè) Foxp3 mRNA、CTLA-4 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、與假手術(shù)對(duì)照組比較，SAP模型組血清脂肪酶、血清淀粉酶、AST、ALT、肺MPO活力和肺濕干重比值明顯增高（P<0.05），胰腺、肺、肝病理損害明顯，組織學(xué)評(píng)分升高（P<0.05）；大黃素治療組以上血清指標(biāo)及 MPO活力均下降

4、（P<0.05），同時(shí)各器官病理損害減輕，組織學(xué)評(píng)分下降（P<0.05）。
　　2、SAP模型組血清中TNF-α、IL-6、MCP-1水平高于假手術(shù)組（P<0.05），而IL-10水平低于假手術(shù)組（P<0.05）；大黃素治療組血清中TNF-α、IL-6、MCP-1水平較SAP模型組顯著下降，而IL-10水平升高（P<0.05）。
　　3、SAP模型組Treg比例及Treg/CD4+T細(xì)胞比值都升高（P<0.05），同時(shí)Fox

5、p3、CTLA-4 mRNA表達(dá)都增強(qiáng)（P<0.05）；大黃素治療組 Treg比例及Treg/CD4+T淋巴細(xì)胞比值較SAP模型組均降低（P<0.05），F(xiàn)oxp3、CTLA-4 mRNA表達(dá)都減弱（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、應(yīng)用5%?；悄懰徕c逆行性胰膽管注射制備SAP全身器官損傷模型，病理學(xué)檢測(cè)證實(shí)：胰腺及肺、肝器官出現(xiàn)不同程度水腫、出血、壞死及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，模型相對(duì)穩(wěn)定，可重復(fù)性好。
　　2、大黃素能夠