自擬枳椇子湯預防性解酒保肝作用的研究.pdf

1、目的：
　　通過動物實驗方法，建立急性酒精性中毒小鼠模型，探討自擬枳椇子湯對急性酒精性中毒小鼠的預防性解酒作用及其肝臟保護機制；通過分子對接模擬方法，探討枳椇子湯解酒保肝的作用靶點及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為治療急性酒精性中毒的臨床用藥提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　?、湃?0只小鼠隨機分成3組，一次性給酒，灌胃劑量為0.14ml/10g、0.16ml/10g、0.18 ml/10g。記錄算出小鼠的醉酒耐受時間、醒酒時間、醉酒率和

2、死亡率。⑵取60只小鼠隨機分成6組：空白組、模型組、陽性對照組（葛花解酲湯組）、枳椇子湯高、中、低劑量組，先給藥后給酒，記錄小鼠醉酒耐受時間、醒酒時間。⑶取40只小鼠隨機分為空白組、模型組、陽性對照組、枳椇子湯組，造模3h后取小鼠肝組織制備肝勻漿，按ADH試劑盒說明書的方法檢測ADH活性。⑷取40只小鼠隨機分為空白組、模型組、陽性對照組和枳椇子湯組。小鼠連續(xù)造模3天后摘眼球取血，按AST、ALT試劑盒說明書測量小鼠血中AST和ALT的含

3、量。⑸取63只小鼠隨機分為0.5h、1.5h、3h這3個時間段組，再分別分為模型組、陽性對照組、枳椇子湯組。造模后在三個時間段分別取血，用氣相色譜法檢測小鼠血乙醇濃度并對其方法學進行研究。⑹構(gòu)建枳椇子湯化學成分分子數(shù)據(jù)庫，通過Atoudocking vina1.1.2分子對接平臺，選取ADH、ALDH、COX-2和OPRM1這4個靶點蛋白，對枳椇子湯中枳椇子、茯苓、砂仁、甘草的化學成分進行虛擬篩選。
　　結(jié)果：
　?、龠x用0

4、.16ml/10g的灌胃劑量作為本實驗最佳的致醉量，因小鼠的醉酒耐受時間和醒酒時間相對較短，致醉率和24h生存率均為100％，方便試驗研究。②與模型組比較，枳椇子湯高、中劑量組和葛花解酲湯組預防性給藥均可明顯延長小鼠的醉酒耐受時間，縮短醒酒時間，具有顯著性差異（P<0.01）。③與空白組比較，模型組、葛花解酲湯組和枳椇子湯組的ADH值均增高，均具有顯著性差異（P<0.01）。與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組的ADH亦增高，具有顯著

5、性差異（P<0.01）。④與空白組比較，模型組小鼠血清AST、ALT活性明顯升高，具有顯著性差異(P<0.01)；與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組具有顯著性差異(P<0.01)；枳椇子湯組與葛花解酲湯組兩組比較無顯著性差異（P>0.05）。⑤與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組在0.5h、1.5h、3h這三個時間段的血乙醇濃度明顯降低，具有顯著性差異P(<0.01)。直接氣相色譜法滿足檢測要求。⑥枳椇子湯有206個藥效成分能作用