電針預處理對七氟醚誘發(fā)老齡大鼠認知功能障礙的影響.pdf

1、目的:術(shù)后認知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction，POCD)是老年患者麻醉手術(shù)后常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥之一。研究證實電針刺激療法可緩解缺血再灌注腦損傷和阿爾茨海默病相關(guān)的認知功能下降，而電針預處理對老年患者術(shù)后認知功能障礙的影響尚未見報道。凋亡是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中清除多余和損傷神經(jīng)元的生理過程，其中不受控制的凋亡可能與多種神經(jīng)退行性疾病和中風的發(fā)生關(guān)系密切。神經(jīng)元凋亡途徑包括線粒體凋亡途徑

2、、膜受體途徑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激途徑等，線粒體凋亡途徑是否參與POCD的發(fā)病及電針預處理的神經(jīng)保護作用過程尚不清楚。本研究擬評價電針預處理對七氟醚誘發(fā)老齡認知功能障礙的影響，為臨床提供參考。
　　方法:健康雄性SD大鼠150只，18～20月齡，體重為550～600 g，采用隨機數(shù)字表法，將其隨機分為3組（n=50）:對照組（C組）、七氟醚麻醉組（S組）和電針預處理組(EA組)。C組于相同環(huán)境下吸入100％氧氣4h，EA組于七氟醚麻醉前5天

3、時開始電針刺激百會穴、大椎穴和足三里30 min，選用疏密波，頻率2Hz/15Hz，強度1mA，以大鼠胡須輕微抖動為電針刺激百會穴、大椎穴有效的標志，以大鼠后肢輕度抖動為電針刺激足三里有效的標志，1次/d，連續(xù)5d。電針處理結(jié)束后24 h時S組和EA組于有機玻璃麻醉箱中吸入3％七氟醚4h。每組隨機取10只大鼠，于七氟醚麻醉結(jié)束后即刻行動脈血氣分析;每組選取10只大鼠，于麻醉結(jié)束后1d時行Morris水迷宮實驗評價大鼠認知功能，連續(xù)6d;

4、于麻醉結(jié)束后第1、6d時，隨機取10只大鼠，斷頭取海馬組織，采用流式細胞術(shù)測定海馬神經(jīng)元線粒體膜電位(MMP)和海馬神經(jīng)元凋亡率，采用Western blot法測定海馬神經(jīng)元胞漿細胞色素c(Cyt c)和活化caspase-3的表達，于透射電子顯微鏡下觀察大鼠海馬神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的病理學改變（線粒體、胞漿、胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及高爾基體）。
　　結(jié)果:3組大鼠動脈血氣分析各指標均在正常范圍內(nèi)，組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

5、>　　與C組比較，S組和EA組大鼠逃避潛伏期延長，穿越原平臺次數(shù)、平臺所在象限停留時間比例減少(P＜0.05），海馬神經(jīng)元凋亡率增加、MMP降低，胞漿Cyt c和活化的caspase-3表達上調(diào)(P＜0.05)。
　　與S組比較，EA組大鼠逃避潛伏期縮短，穿越原平臺次數(shù)增加，平臺所在象限停留時間比例增加（P＜0.05），海馬神經(jīng)元凋亡率降低，MMP增高，而海馬神經(jīng)元胞漿Cyt c和活化的caspase-3表達下調(diào)(P＜0.05)。

6、
　　電鏡下C組大鼠各時點海馬神經(jīng)元各細胞器結(jié)構(gòu)等未見明顯異常;S組大鼠麻醉后第1天時，海馬神經(jīng)元明顯水腫，細胞核皺縮，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，線粒體嵴內(nèi)外膜融合，出現(xiàn)空泡化;麻醉后第7天時，海馬神經(jīng)元胞質(zhì)水腫減輕，胞核皺縮，部分線粒體仍表現(xiàn)出空泡化，高爾基體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)異常;EA組麻醉后第1天時，電鏡下見海馬神經(jīng)元胞質(zhì)輕度水腫，少部分線粒體呈空泡化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)雖略有異常，但并沒有擴張及脫顆?，F(xiàn)象出現(xiàn)，麻醉后第7天時，可見海馬神