
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本研究擬通過(guò)探討鹵族類揮發(fā)性麻醉劑七氟醚預(yù)處理對(duì)老齡大鼠術(shù)后認(rèn)知功能障礙的影響情況,為臨床相關(guān)試驗(yàn)研究及麻醉管理提供參考。
方法:健康成年雄性SD大鼠138只,18月齡,體重為400~450 g,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將其隨機(jī)分為3組(n=46):對(duì)照組(C組)、手術(shù)組(O組)及七氟醚預(yù)處理組(Sev組)。
C組:僅對(duì)大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉處理,而不對(duì)其進(jìn)行任何的手術(shù)操作。
O組:腹腔注射戊巴比妥
2、鈉麻醉大鼠后,對(duì)其行剖腹探查手術(shù),即對(duì)大鼠進(jìn)行備皮、消毒,然后經(jīng)腹部正中切口、用鑷子鈍性分離腹部肌肉并顯露腹膜、解剖剪剪開(kāi)腹膜并暴露腹腔,應(yīng)用探查針依次探查大鼠的肝臟、脾臟、胃、小腸及大腸,手術(shù)時(shí)間共為30 min,手術(shù)結(jié)束后縫合傷口,并于傷口處粘貼透氣防水傷口貼膜,最后腹腔注射青霉素,以防止術(shù)后傷口發(fā)生感染。
Sev組:將大鼠置于有機(jī)玻璃麻醉箱內(nèi),進(jìn)氣端連接七氟醚揮發(fā)罐,以純氧作為載體氣體,出氣端連接麻醉氣體監(jiān)測(cè)儀,維持麻醉
3、箱內(nèi)七氟醚的濃度為2.4%,麻醉箱底部鋪設(shè)少量的鈉石灰以用來(lái)吸收二氧化碳,持續(xù)30 min后吸入空氣,吸入空氣30 min后,處理同O組。
每組隨機(jī)選取10只大鼠,分別于術(shù)前30 min及術(shù)后第1、3、5、7天時(shí),行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),并記錄大鼠在原平臺(tái)象限停留的時(shí)間、逃避潛伏期和穿越原平臺(tái)的次數(shù)。分別于術(shù)前30 min及術(shù)后第1、7天時(shí),每組隨機(jī)選取10只大鼠,麻醉后取海馬組織,采用TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)測(cè)定海馬神經(jīng)
4、元的凋亡指數(shù);流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定海馬神經(jīng)元胞漿Ca2+離子濃度([Ca2+]i)、凋亡率;透射電鏡下觀察大鼠海馬神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的病理學(xué)改變(線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、胞漿及胞核)。每組隨機(jī)選取6只大鼠,分別于術(shù)前即刻(T0)、術(shù)中10 min(T1)、20 min(T2)、30 min(T3)時(shí),記錄體溫并采集動(dòng)脈血樣行血?dú)夥治觥?br> 結(jié)果:3組不同時(shí)間點(diǎn)的體溫及血?dú)夥治龈髦笜?biāo)均在正常范圍內(nèi),組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
5、。
與術(shù)前30 min時(shí)比較,O組術(shù)后各時(shí)點(diǎn)大鼠原平臺(tái)象限停留時(shí)間縮短、逃避潛伏期延長(zhǎng)和穿越原平臺(tái)次數(shù)減少,大鼠海馬神經(jīng)元胞漿[Ca2+]i、凋亡指數(shù)/凋亡率升高(P<0.05); Sev組術(shù)后第1、3、5天時(shí)原平臺(tái)象限停留時(shí)間縮短、逃避潛伏期延長(zhǎng)和穿越原平臺(tái)次數(shù)減少,術(shù)后第1天時(shí)大鼠海馬神經(jīng)元胞漿[Ca2+]i、凋亡指數(shù)/凋亡率升高(P<0.05),Sev組術(shù)后第7天時(shí)上述各指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C組術(shù)后各時(shí)
6、點(diǎn)上述各指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
與C組比較,O組術(shù)后各時(shí)點(diǎn)大鼠原平臺(tái)象限停留時(shí)間縮短、逃避潛伏期延長(zhǎng)和穿越原平臺(tái)次數(shù)減少,大鼠海馬神經(jīng)元的胞漿的[Ca2+]i、凋亡指數(shù)/凋亡率升高(P<0.05);Sev組術(shù)后第1、3、5天時(shí)原平臺(tái)象限停留時(shí)間縮短、逃避潛伏期延長(zhǎng)和穿越原平臺(tái)次數(shù)減少,Sev組術(shù)后第1天時(shí)大鼠海馬神經(jīng)元胞漿[Ca2+]i、凋亡指數(shù)/凋亡率升高(P<0.05),Sev組術(shù)后第7天時(shí)上述各指標(biāo)差異無(wú)
7、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
與O組比較,Sev組術(shù)后各時(shí)點(diǎn)大鼠原平臺(tái)象限停留的時(shí)間延長(zhǎng)、逃避潛伏期縮短和穿越原平臺(tái)的次數(shù)增加,大鼠海馬神經(jīng)元胞漿[Ca2+]i、凋亡指數(shù)/凋亡率降低(P<0.05)。
電鏡下可見(jiàn)C組海馬神經(jīng)元胞漿內(nèi)各細(xì)胞器結(jié)構(gòu)未見(jiàn)明顯異常;O組術(shù)后第1天時(shí),海馬神經(jīng)元胞質(zhì)高度水腫,線粒體嵴內(nèi)外膜融合消失及空泡化,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒,術(shù)后第7天時(shí),胞質(zhì)水腫減輕,多數(shù)線粒體仍表現(xiàn)為空泡化,高爾基體及粗面內(nèi)
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