版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、本文對(duì)感染后腸易激綜合征小鼠模型中腸道免疫及粘膜屏障功能的改變進(jìn)行了研究。本研究分為三個(gè)部分:
第一部分:感染后腸易激綜合征小鼠模型的建立。
目的:觀察NIH小鼠感染旋毛蟲2周,8周后腸道組織病理改變及內(nèi)臟敏感性的改變,建立一個(gè)可以真實(shí)模擬人體腸易激綜合征特征的動(dòng)物模型。
方法:6-8周齡雄性NIH小鼠給予350-400只旋毛蟲灌胃,感染2周,8周后用HE染色的方法評(píng)估近端結(jié)腸,遠(yuǎn)端結(jié)腸,空腸,回腸組織病理
2、情況,并對(duì)炎癥程度進(jìn)行評(píng)分;采用腹壁回撤反應(yīng)(AWR)評(píng)分判斷小鼠對(duì)結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)的內(nèi)臟敏感性。
結(jié)果: NIH小鼠在感染旋毛蟲2周后,HE染色顯示腸道組織明顯充血水腫,固有層及粘膜層出現(xiàn)大量的中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn),粘膜層破壞嚴(yán)重,并伴有中重度間質(zhì)性水腫,呈明顯炎癥性改變,炎癥評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組小鼠(P<0.05);而感染8周后的NIH小鼠腸道組織HE染色則未顯示明顯損傷及炎癥浸潤(rùn),組織學(xué)評(píng)分也與正常組織無明
3、顯差異(P>0.05)。在直腸擴(kuò)張壓力為40mmHg,60mmHg時(shí),感染后2周模型組小鼠AWR評(píng)分顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05);感染后8周模型組小鼠AWR評(píng)分低于2周模型組小鼠(P<0.05),但高于正常對(duì)照組小鼠(P<0.05)。2周,8周模型組小鼠的疼痛閾值均小于正常組(P<0.05),且2周模型鼠疼痛閾值小于8周組(P<0.05)。
結(jié)論: NIH小鼠在感染旋毛蟲8周后腸道炎癥消退,內(nèi)臟高敏感性持續(xù)存在,是一個(gè)良
4、好的伴有內(nèi)臟高敏感的感染后腸易激綜合征動(dòng)物模型。
第二部分:感染旋毛蟲小鼠腸道炎癥因子和屏障功能的改變。
目的:研究旋毛蟲感染NIH小鼠后不同時(shí)期腸道炎癥因子TNF-α,IL-12,IL-6, IL-4,IL-10,IL-17表達(dá)的變化及腸道通透性的變化。
方法:給予6-8周齡雄性NIH小鼠旋毛蟲灌胃,感染2周,8周后用HE染色的方法評(píng)估近端結(jié)腸,遠(yuǎn)端結(jié)腸,空腸,回腸組織病理情況,并對(duì)炎癥程度進(jìn)行評(píng)分;采用
5、Western-blot檢測(cè)各組小鼠回腸炎癥因子TNF-α,IL-12,IL-6,IL-4,IL-10,IL-17及緊密連接蛋白Occludin-1和Claudin-1的含量,對(duì)比各組間含量的差異;采用Ussing Chamber檢測(cè)各組小鼠回腸絨毛上皮(VE)和濾泡相關(guān)上皮(FAE)跨膜電阻值(TER)和異硫氰酸熒光素標(biāo)記的大分子右旋糖苷(FD440KD)通過率的改變。
結(jié)果: NIH小鼠在感染旋毛蟲2周后,HE染色顯示腸道
6、組織明顯充血水腫,固有層及粘膜層出現(xiàn)大量的中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn),粘膜層破壞嚴(yán)重,并伴有中重度間質(zhì)性水腫,呈明顯炎癥性改變,炎癥評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組小鼠(P<0.05);而感染8周的NIH小鼠腸道組織HE染色則未顯示明顯炎癥浸潤(rùn),組織學(xué)評(píng)分也與正常組織無明顯差異(P>0.05)。感染8周組小鼠IL-12的表達(dá)量明顯高于正常對(duì)照組(P<0.05),而感染2周組小鼠IL-12的表達(dá)量與正常對(duì)照組無明顯差異(P>0.05);2周,8周
7、模型組小鼠IL-4表達(dá)量高于正常組,IL-10含量低于正常組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而TNF-α,IL-6, IL-17的表達(dá)量與正常組相比無明顯變化。2周模型組小鼠緊密連接蛋白 Occludin-1和Claudin-1的表達(dá)明顯低于正常組和8周模型組(P<0.05),而8周模型組中兩者含量低于正常組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2周,8周模型組VE的TER和FD4通過率明顯低于正常對(duì)照組(P<0.05);而FVE的TER
8、和FD4通過率與正常對(duì)照組相比無明顯改變(P>0.05)。
結(jié)論:研究結(jié)果提示在旋毛蟲感染后的不同時(shí)期,小鼠腸道組織炎癥表現(xiàn)及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制并不相同,回腸均存在屏障功能的異常及通透性的增加,且主要存在于絨毛上皮,但不同時(shí)期引起回腸通透性增加的機(jī)制可能不同。
第三部分:PI-IBS小鼠固有層樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)粘膜屏障異常和內(nèi)臟高敏。
目的:在感染后腸易激綜合征(PI-IBS)的發(fā)展過程中,輕度炎癥越來越引起人們的注
9、意。固有層樹突狀細(xì)胞(LPDCs)作為一種抗原提呈細(xì)胞,在免疫激活中起了非常重要的作用。本研究旨在驗(yàn)證LPDCs可能有利于PI-IBS小鼠模型中腸道通透性的增加及內(nèi)臟高敏感的形成。
方法:通過給予旋毛蟲建立 PI-IBS小鼠模型。腹壁回撤反射(AWR)用于評(píng)估內(nèi)臟敏感性。通過常規(guī)HE染色進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分及腸道細(xì)胞因子表達(dá)量的檢測(cè)來評(píng)估腸道炎癥。采用Ussing Chamber測(cè)量跨上皮電阻和FD4通透性。Western blot
10、ting檢測(cè)小鼠腸道組織緊密連接蛋白的表達(dá)量來評(píng)估腸道通透性。透射電鏡技術(shù)觀察小鼠腸道上皮細(xì)胞間緊密連接蛋白的結(jié)構(gòu)。處死小鼠后,消化腸道組織,并采用磁珠細(xì)胞分選術(shù)分離純化 LPDCs,然后將從PI-IBS小鼠模型中及正常對(duì)照組小鼠腸道中提取的1×106 LPDCs通過尾靜脈注射過繼給相應(yīng)的正常小鼠。在過繼LPDCs120h后,根據(jù)上述方法對(duì)小鼠進(jìn)行AWR評(píng)分,腸道炎癥和通透性進(jìn)行評(píng)估。
結(jié)果:小鼠在旋毛蟲感染的急性期及慢性期均
11、表現(xiàn)出腸道炎癥的出現(xiàn),粘膜通透性的增加及內(nèi)臟高敏感性的形成。過繼了PI-IBS小鼠模型LPDCs的小鼠出現(xiàn)了輕度的炎癥----小鼠回腸組織中細(xì)胞因子 IL-4的表達(dá)量明顯增加。同時(shí),過繼了PI-IBS小鼠LPDCs的小鼠回腸TER明顯降低,且出現(xiàn)超微結(jié)構(gòu)的改變,粘膜通透性增加。更有意思的是,接受了PI-IBS小鼠LPDCs的小鼠AWR評(píng)分明顯升高而疼痛閾值明顯降低。
結(jié)論: PI-IBS小鼠模型中的LPDCs不僅能夠?qū)⒛c道炎癥
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 感染后腸易激綜合征小鼠腸道免疫的研究.pdf
- 腸易激綜合征腸粘膜屏障功能的研究.pdf
- 腸道感染、精神因素、應(yīng)激與腸易激綜合征.pdf
- 白介素1β在感染后腸易激綜合征中的表達(dá)及意義.pdf
- 腸黏膜生物屏障與腸易激綜合征的治療.pdf
- 腸易激綜合征
- 腸易激綜合征牡
- 便秘型腸易激綜合征模型大鼠腸道Cajal間質(zhì)細(xì)胞的研究.pdf
- 腸易激綜合征診斷治療
- 腸易激綜合征-醫(yī)學(xué)課件
- 腸易激綜合征的診斷治療
- 腸易激綜合征的新概念
- NLRP3炎性小體在感染后腸易激綜合征中的作用.pdf
- 嬰兒雙歧桿菌對(duì)腸易激綜合征小鼠腸道黏膜肥大細(xì)胞上CRF受體表達(dá)及腸黏膜屏障功能的影響.pdf
- 腸易激綜合征患者胃運(yùn)動(dòng)功能的研究.pdf
- 腸易激綜合征患者腸道菌群及HPT軸改變與其臨床癥狀相關(guān)性.pdf
- 腸易激綜合征患者腸粘膜Th1-Th2漂移的研究.pdf
- 腸易激綜合征診斷與治療
- 腸易激綜合征及其藥物治療
- 腸易激綜合征及其藥物治療
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論