Par-4在2型糖尿病胰島β細(xì)胞凋亡中的機(jī)制研究.pdf

1、第一部分 Par-4在2型糖尿病小鼠胰島β細(xì)胞凋亡中的影響
　　目的：胰島β細(xì)胞凋亡在2型糖尿病胰島細(xì)胞功能失調(diào)中占有重要地位。既往研究發(fā)現(xiàn)前列腺凋亡反應(yīng)因子-4（Par-4）是一種常見(jiàn)的促凋亡因子，可誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡。但Par-4/NF-κB是否參與誘導(dǎo)2型糖尿病胰島β細(xì)胞凋亡過(guò)程尚不清楚。
　　方法：小劑量STZ+高脂飲食構(gòu)建2型糖尿病小鼠模型，并敲除小鼠Par-4表達(dá)。將小鼠分為4組：正常組、糖尿病組、正常+Par

2、-4敲除組、糖尿病+Par-4敲除組，檢測(cè)Par-4， NF-κB的表達(dá)，胰島β細(xì)胞凋亡和胰島素分泌情況。
　　結(jié)果：與正常組相比，正常+Par-4敲除組Par-4和NF-κB表達(dá)和分泌以及細(xì)胞凋亡，胰島素分泌能力無(wú)顯著變化，而糖尿病組Par-4和NF-κB表達(dá)顯著升高，血液中Par-4的濃度升高，胰島β細(xì)胞凋亡明顯增多，分泌胰島素的能力下降；與糖尿病組相比，糖尿病+Par-4敲除組少量表達(dá)Par-4和NF-κB，血液中Par-4

3、的濃度較之糖尿病組有所下降，核內(nèi)Par-4和NF-κB的表達(dá)有所下降，胰島β細(xì)胞凋亡顯著下降，分泌胰島素的能力有所上升。
　　推論：2型糖尿病可促進(jìn)Par-4分泌和Par-4和NF-κB表達(dá)，誘導(dǎo)2型糖尿病胰島β細(xì)胞凋亡和功能不全，敲除Par-4的2型糖尿病小鼠NF-κB表達(dá)下降，胰島β細(xì)胞凋亡和胰島功能不全有所改善。
　　第二部分 Par-4參與糖脂聯(lián)合毒性誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
　　目的：胰島β細(xì)胞凋亡是2型

4、糖尿病最重要的病理生理特征，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體功能失調(diào)在其中扮演了重要角色。既往研究發(fā)現(xiàn)前列腺凋亡反應(yīng)因子-4（Par-4）/NF-κB通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體功能失調(diào)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。但Par-4/NF-κB是否通過(guò)內(nèi)源性和外源性機(jī)制誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞凋亡尚未可知。
　　方法：使用高糖高脂干預(yù)模擬2型糖尿病體外模型，培養(yǎng)好的NIT-1細(xì)胞分為：①正常組(C組)②正常+Par-4過(guò)表達(dá)組（C+Par-4組）③正常+Par-4抑制組（C-

5、Par-4組）④高糖高脂組（H組）⑤高糖高脂+Par-4過(guò)表達(dá)組（H+Par-4組）⑥高糖高脂+ Par-4抑制組（H-Par-4組），檢測(cè)Par-4，NF-κB表達(dá)情況以及其轉(zhuǎn)錄水平活性，檢測(cè)凋亡路徑相關(guān)標(biāo)志物；
　　結(jié)果：發(fā)現(xiàn)在高糖高脂干預(yù)下，Par-4的表達(dá)和分泌上升，增加了NF-κB表達(dá)并激活器轉(zhuǎn)錄活性，誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞凋亡，過(guò)表達(dá)Par-4會(huì)加重此過(guò)程，下調(diào)Par-4會(huì)減輕該效應(yīng)，同時(shí)，抑制NF-κB表達(dá)也會(huì)減輕Par