從人體腸道篩選能去除膽固醇的菌株及其去除機理研究.pdf

1、益生菌（probiotics）是一類來源于宿主并對宿主健康具有一定促進作用的微生物活體，具有獨特的生理作用而得到越來越廣泛的研究應用。心血管疾病已逐漸成為人類健康的頭號殺手，膽固醇升高是主要因素之一。大量實驗證實不同種類的乳酸菌具有降低膽固醇的效果。 本研究從青年人腸道出發(fā)，通過傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法，使用厭氧盒與選擇性培養(yǎng)基，篩選出雙歧桿菌與乳桿菌，轉(zhuǎn)接三代后的菌株分別接入含有膽固醇的培養(yǎng)基，24h后測定膽固醇的去除量。同時測定菌

2、株的生長特性，終pH值等基本特征。在此同時，對篩選結(jié)果的16SsDNA測序并提交GENEBANK獲得序列號（ACCESSION NUMBER）,從而鑒定到種，用于進一步實驗。 本研究分析了菌株去除膽固醇后的總的膽固醇分布情況，以探討菌株對于膽固醇去除的具體機理。測定了不同接種量、不同去除時間對膽固醇去除率的影響和膽固醇去除的時間曲線等。 整個研究從最初的120多株菌中，篩選得到20株腸道益生菌，有9株對培養(yǎng)基中膽固醇的去

3、除率達到了35％以上，實驗所用的乳桿菌的不同種乃至不同菌株，對膽固醇的去除具有菌株特異性。 研究使用了三種不同的篩選方法：常規(guī)方法、BSH酶活性的篩選法與終pH篩選法。BSH酶活性的篩選法并未得到有規(guī)律的結(jié)果，終pH測定篩選法可以作為一種輔助的手段, 常規(guī)方法還是最實用的的方法. 研究中篩選得到兩株植物乳桿菌Lp529和Lp501，其生長穩(wěn)定，同時具有較強的耐酸、耐膽汁鹽和去除膽固醇能力，是綜合性能最好的2株菌，可以作為潛力菌株

4、，也將它們作為樣本進行膽固醇去除機理的研究。 研究發(fā)現(xiàn)，膽固醇的去除過程并沒有發(fā)生在對數(shù)生長前期，膽固醇的去除與它進入穩(wěn)定期的狀況有很大的關系。不同的菌液接入量對去除量沒有顯著影響，去除時間48h時的膽固醇去除量要大于24h，不同菌株對膽固醇經(jīng)過48h去除后，去除率較接近。 研究發(fā)現(xiàn)，Lp501去除的膽固醇，有45％進入其細胞內(nèi)部，55％沉淀于細胞外部；Lp529去除的膽固醇則有65％被吸收入其細胞內(nèi)部，33％沉淀于細胞