“三水冬荷”的親緣關(guān)系鑒定及耐寒基因的表達(dá)分析.pdf

1、本研究首先采用ISSR分子標(biāo)記分析了“三水冬荷”和普通荷花品種的親緣關(guān)系，推測其遺傳來源；然后運(yùn)用半定量PCR方法比較了“三水冬荷”和普通荷花品種幼苗在低溫脅迫中的5個(gè)耐寒基因的表達(dá)模式，以檢驗(yàn)“三水冬荷”是否比普通荷花品種耐寒。 篩選了12條ISSR引物對(duì)包括3個(gè)“三水冬荷”品種(冬紅花、雪里紅花、傲霜)在內(nèi)的87個(gè)荷花品種進(jìn)行了ISSR分析，共擴(kuò)增出138條帶，其中多態(tài)帶77條，多態(tài)率為55.8％，具有比較低的遺傳多態(tài)性，這

2、可能與其主要靠地下莖進(jìn)行無性繁殖和長期的人工選擇有關(guān)。聚類分析表明中國蓮種系和美國蓮種系遺傳分化較大，支持將其處理為中國蓮和美國蓮兩個(gè)亞種。3個(gè)“三水冬荷”品種親緣關(guān)系很近，可能均由相同或相近的品種選育而來。3個(gè)“三水冬荷”品種與幾個(gè)中美雜種蓮種系品種和中國蓮種系品種具有較近的親緣關(guān)系，這表明三水冬荷很可能來自于中美雜種蓮，并且遺傳組成上以中國蓮的遺傳物質(zhì)為主，同時(shí)包含少部分美國蓮的遺傳物質(zhì)。一些基于花色、花瓣數(shù)目、株型的形態(tài)分類與遺傳

3、組成上沒有明顯的相關(guān)性，但考慮園藝植物品種分類實(shí)用的原則，應(yīng)予以保留。 選取2個(gè)“三水冬荷”品種(冬紅花和雪里紅花)和2個(gè)普通荷花品種(湘蓮和太空蓮)進(jìn)行低溫脅迫生理實(shí)驗(yàn)，各品種種子在25℃下萌發(fā)5天后轉(zhuǎn)入7-12℃處理15天，再重新移回25℃進(jìn)行恢復(fù)生長。結(jié)果表明，低溫處理下“三水冬荷”和普通荷花品種均停止生長，但保持綠葉，低溫處理過后都能恢復(fù)生長。 選用了1個(gè)“三水冬荷”品種(冬紅花)和2個(gè)普通荷花品種(湘蓮和紅頭巾

4、)，取其種子于25℃下萌發(fā)，兩天后移入4℃冷處理兩天，之后再移入25℃恢復(fù)生長兩天。對(duì)5個(gè)耐寒相關(guān)基因NnHSP90，NnMT2a，NnMT2b，NnEDRl5，NnMnSOD的表達(dá)進(jìn)行了半定量PCR實(shí)驗(yàn)分析。結(jié)果表明，在冷處理或者冷處理后的恢復(fù)過程中，冬紅花要么與紅頭巾或湘蓮的基因表達(dá)模式相似，要么三個(gè)品種一致，要么冬紅花表現(xiàn)出較低的耐寒性。因此“三水冬荷”秋冬季開花、群體花期長不大可能是因?yàn)橛懈叩哪秃?，而很可能與冬荷品種地下莖不