木素過氧化物酶的生產(chǎn)、固定化及其在染料降解中應(yīng)用.pdf

1、本文研究了利用鼓泡塔間歇培養(yǎng)固定化黃孢原毛平革菌合成木素過氧化物酶，通過初步分離純化后，采用兩種不同的材料進(jìn)行酶的固定化，研究了固定化條件、固定化酶性質(zhì)、固定化酶對(duì)染料的降解脫色。 研究發(fā)現(xiàn)，使用鼓泡式反應(yīng)器進(jìn)行固定化黃孢原毛平革菌培養(yǎng)合成木素過氧化物酶，更有利于產(chǎn)酶。考察了通氣量對(duì)鼓泡式反應(yīng)器合成木素過氧化物酶的影響，通氣量在1.2vvm對(duì)產(chǎn)酶比較有利，酶活達(dá)到了234U/L，與在相同的培養(yǎng)基和相同的固定化載體用量下的搖瓶培養(yǎng)

2、產(chǎn)酶相比，酶活提高了近50％。 發(fā)酵液經(jīng)過冷凍除雜多糖、超濾、硫酸銨沉淀、透析等步驟進(jìn)行初步分離純化，比酶活提高1.85倍，酶活得率52.7％，酶活達(dá)到了1167U/L。 篩選出固定化效果較好的XAD7HP大孔樹脂，研究了其固定化條件。結(jié)果表明，吸附4h，吸附溫度25℃，酶液pH 4.5，戊二醛濃度0.2％、戊二醛處理時(shí)間120min、獲得的效果最好，固定化酶活力可達(dá)16U/g(載體)。研究了木素過氧化物酶和葡萄糖過氧化

3、物酶雙酶的共固定化條件，最佳酶比為1:5?？疾炝斯潭ɑ傅淖钸mpH值、最適溫度和操作的穩(wěn)定性。表明固定化酶具有更廣的使用范圍和穩(wěn)定性。 利用聚氨酯泡沫共價(jià)交聯(lián)法制備固定化酶，固定化木素過氧酶活力達(dá)到12.6U/g；共固定化雙酶活為7.84U/g。探討了固定化木素過氧酶和共固定化雙酶最適反應(yīng)溫度、最適反應(yīng)pH和操作的穩(wěn)定性。多次的重復(fù)使用表明，木素過氧化物酶和共固定化酶都有良好的穩(wěn)定性。 研究了固定化木素過氧化物酶對(duì)染料的