GM-CSF對肥大細胞蛋白酶激活受體表達和介質(zhì)分泌的影響及其信號轉(zhuǎn)導通路探討.pdf

1、分類號R392汕頭大學碩士學位論文題目GMCSF對肥大細胞蛋白酶激活受體表達和介質(zhì)分泌的影響及其信號轉(zhuǎn)導通路探討英文題目ModulationofMastCellProteinaseActivatedReceptExpressionCytokineReleasebyGMCSFthePotentialSignalTransductionPathways研究生姓名張連霞張連霞學號1051002210510022專業(yè)病理學與病理生理學病理學與病

2、理生理學導師姓名何韶衡何韶衡職稱“長江學者”特聘教授“長江學者”特聘教授入學日期2005年9月2005年9月答辯日期2008年6月2008年6月汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文摘要背景與目的：蛋白酶激活受體（proteaseactivatedrecepts，PARs），白細胞介素（interleukin，IL）IL4，IL6參與過敏反應的發(fā)生，粒巨噬細胞集落刺激因子（granulocytemacrophagecolonystimulating

3、fact，GMCSF）具有調(diào)節(jié)免疫應答的功能，然而GMCSF對肥大細胞分泌細胞因子的影響還不甚清楚。因此本研究探討GMCSF對肥大細胞P815PARs表達和IL4，IL6分泌的影響，并探討可能的信號轉(zhuǎn)導通路。方法：肥大細胞P815激發(fā)后，收集各時間點的細胞和上清。細胞處理后采用實時定量PCR和流式細胞術的方法在mRNA和蛋白水平檢測PAR1，PAR2，PAR3和PAR4表達情況，用細胞激發(fā)信號ELISA（cellularactivati

4、onofsignalingELISACASE）方法檢測信號轉(zhuǎn)導通路蛋白Akt，ERK，p38和STAT3磷酸化情況；上清用ELISA方法檢測IL4，IL6水平。結(jié)果：GMCSF上調(diào)PAR2蛋白和mRNA在肥大細胞P815上的表達；GMCSF上調(diào)PAR1PAR3和PAR4mRNA在肥大細胞P815的表達；GMCSF抗體的應用可以阻斷GMCSF對PARs蛋白表達的調(diào)節(jié)作用。GMCSF以濃度依賴的方式促進肥大細胞P815分泌IL4和IL6；應

5、用PD98059U0126和LY294002可以阻斷GMCSF引起的肥大細胞IL4和IL6分泌并抑制其引起的ERK和Akt磷酸化。結(jié)論：GMCSF能夠調(diào)節(jié)肥大細胞PARs表達并刺激肥大細胞分泌IL4和IL6。GMCSF引起肥大細胞P815分泌細胞因子很可能是通過激活Akt和ERK信號轉(zhuǎn)導通路實現(xiàn)的，這些發(fā)現(xiàn)提示GMCSF可以條件依賴性的調(diào)節(jié)Th1細胞因子和或Th2細胞因子分泌從而在過敏性炎癥中發(fā)揮重要作用。關鍵詞：肥大細胞，蛋白酶激活受