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文檔簡介
1、本文采用透明圈平板篩選、單因子及多因子正交試驗、超濾濃縮、Sephadex G-100凝膠層析、SDS-PAGE等方法，從現(xiàn)有菌種資源篩選出一個產(chǎn)木聚糖酶菌株，并對該菌株的適宜發(fā)酵條件、產(chǎn)酶規(guī)律、分離純化方法和酶學特性進行了初步研究，得到電泳純木聚糖酶樣品，為木聚糖酶的工業(yè)化生產(chǎn)和應用提供了科學依據(jù)。通過本實驗得出以下結(jié)論： 1、從現(xiàn)有菌種資源中篩選出1個高產(chǎn)木聚糖酶的Erwinia carotovora變異菌株，編號為CXJZ
2、11-01。 2、獲得該菌株適宜生長和發(fā)酵培養(yǎng)基最佳配方，以蛋白胨作為該菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源，發(fā)酵8.0h即出現(xiàn)產(chǎn)酶高峰，發(fā)酵液酶活達到344U/ml。 3、變異菌株CXJZ11-01所產(chǎn)木聚糖酶最佳測定體系：0.1mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；pH5.8；以木聚糖為底物，濃度0.8﹪；溫度60℃；DNS量2.0ml～2.5ml；顯色時間5min；測定波長540nm。 4、變異菌株CXJXZ11.01所產(chǎn)木聚
3、糖酶優(yōu)化分離條件為：50kD、10kD、5kD膜包超濾濃縮及Sephadex G-100凝膠層析。木聚糖酶的純化倍數(shù)為13.25，收率為45.4﹪，通過SDS-PAGE得到單一條帶，測定其分子量為29.3kD。 5、變異菌株CXJZ11-01所產(chǎn)木聚糖酶的酶學性質(zhì)為：穩(wěn)定pH范圍3.4～6.4，作用pH范圍4.0～7.0，最適pH5.8；熱穩(wěn)定溫度在60℃以下，適宜溫度范圍是35℃～60℃；Fe<'2+>、Co<'2+>和Mn<
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