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文檔簡介
1、我們分別對該試驗室分離得到的六個植物MARs(TM1,TM2,TM3,AM1,AM2,AM4)進行ARS(Autonomous Replicating Sequence)功能鑒定,發(fā)現(xiàn)TM1和AM4具有強的自主復制功能,而其他四個植物MARs序列無ARS活性.為了進一步對酵母自主復制功能進行深入研究,利用PCR方法對TM1和AM4進行亞克隆,相應亞克隆分別命名為TM1-1、TM1-2、TM1-3、AM4-1、AM4-2和AM4-3.實驗
2、發(fā)現(xiàn),TM1-3和AM4-3不僅具有比完整MARs更高的活性,而且在酵母轉(zhuǎn)化效率、轉(zhuǎn)化穩(wěn)定性及生長速度方面也優(yōu)于完整片段.為進一步證明具有ARS功能的MAR增強外源基因表達作用,我們將具有ARS功能的TM1和AM4以及具有ARS功能的亞克隆片段TM1-3和AM4-3分別插入植物表達載體pBI121中gus基因表達盒的兩側(cè),通過轉(zhuǎn)基因植株來檢測這四個片段對gus基因表達的影響.實驗結(jié)果表明,TM1、TM1-3、AM4、AM4-3分別使外源
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