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文檔簡介
1、 本文通過基因工程手段利用SOE方法，對(duì)其進(jìn)行改造，IL-18第39精氨酸殘基和第40天冬氨酸殘基之間插入一個(gè)甘氨酸殘基，從而構(gòu)建了RGD模體，并將此突變的cDNA片段構(gòu)建于質(zhì)粒pPIC9K，電擊轉(zhuǎn)化入畢赤酵母GS115中，進(jìn)行分泌型表達(dá)，對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行用SephadexG-100凝膠過濾純化表達(dá)產(chǎn)物，獲得初步純化的蛋白。對(duì)該純化蛋白Western-blot分析具有相同的灰度，說明選擇的抗體與IL-18識(shí)別位點(diǎn)不在RGD位置附近?！?/p>
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