北京油雞cDNA文庫(kù)構(gòu)建及IL-18基因的克隆與表達(dá)研究.pdf

1、構(gòu)建北京油雞cDNA文庫(kù)對(duì)于北京油雞遺傳資源的保護(hù)以及其基因功能的研究具有重要意義。 本實(shí)驗(yàn)取北京油雞肝臟組織，提取總RNA，運(yùn)用SMARTTM技術(shù)構(gòu)建了北京油雞肝臟組織cDNA文庫(kù)，所構(gòu)建的cDNA文庫(kù)未擴(kuò)增文庫(kù)滴度為2.01×106pfu/mL，擴(kuò)增文庫(kù)滴度為1.17×1010 pfu/mL，重組率為93.8％，平均插入片段大小約為1.0 kb。本研究的實(shí)施不僅對(duì)于雞基因結(jié)構(gòu)與功能研究具有重要意義，而且對(duì)于北京油雞基因資源的

2、保存具有重要意義。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)組織塊貼壁培養(yǎng)法，成功構(gòu)建了多浪羊的成纖維細(xì)胞系，并對(duì)其進(jìn)行了多項(xiàng)生物學(xué)特性檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明，細(xì)胞系的各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到美國(guó)典型培養(yǎng)物中心ATCC（American type Culture Collection）細(xì)胞系鑒定標(biāo)準(zhǔn)，為研究外源基因在成纖維細(xì)胞中的表達(dá)與調(diào)控提供了優(yōu)質(zhì)的靶細(xì)胞。 本實(shí)驗(yàn)采用BamHⅠ與XhoⅠ雙酶切法建立北京油雞pGEX—4T-1—IL-18原核表達(dá)載體，并在BL2