α-氰基丙烯酸酯與5-氟尿嘧啶復(fù)合物在預(yù)防移植靜脈再狹窄中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)（CABG）是治療冠心?。–HD）的主要手段之一，而術(shù)后移植靜脈再狹窄嚴(yán)重影響了橋血管的通暢率和患者預(yù)后。α-氰基丙烯酸酯生物膠（α-Cyanoacrylate，α-CA）和5-氟尿嘧啶（5-fluorouraci，5-Fu）血管外局部用藥對(duì)預(yù)防移植靜脈內(nèi)膜增生及管腔狹窄都有積極明確的效果，本研究將二者進(jìn)行復(fù)合形成新的血管外支持載藥應(yīng)用于大鼠自體頸靜脈動(dòng)脈移植模型中，模擬CABG術(shù)后病理生理過程進(jìn)行研究，驗(yàn)證新理

2、念的可行性，為移植靜脈再狹窄的治療提供新思路和新方法。
　　方法：將48SD大鼠（雌雄不拘，周齡10-12周，體重220-280g），隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組（sham group,S）、對(duì)照組（control group,C）、膠水組（α-cyanoacrylate，α-CA）、5-氟尿嘧啶組（5-fluorouraci，5-FU），每組12只大鼠。假手術(shù)組僅模擬手術(shù)過程，進(jìn)行頸外靜脈游離，側(cè)枝結(jié)扎，不斷血管，不行移植；對(duì)照組行同

3、側(cè)頸靜脈-頸動(dòng)脈移植；膠水組行同側(cè)頸靜脈-頸動(dòng)脈移植，移植靜脈外涂抹α-CA膠；5-氟尿嘧啶組行同側(cè)頸靜脈-頸動(dòng)脈移植，移植靜脈外涂抹α-CA膠與5-氟尿嘧啶復(fù)合物。應(yīng)用改良“CUFF”法進(jìn)行建模。血清ELISA共分4個(gè)點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)：T0：術(shù)前，T1：術(shù)后即刻，T2：術(shù)后36小時(shí)，T3：處死日，術(shù)后4周。ELISA法進(jìn)行ET-1及TNF-α的檢測(cè)。術(shù)后4周處死實(shí)驗(yàn)大鼠，肉眼觀察移植靜脈的變化，取新鮮橋血管固定保存后，進(jìn)行HE染色，通過顯微

4、鏡及計(jì)算機(jī)圖像處理軟件觀察測(cè)定內(nèi)、中和外膜增生情況；進(jìn)行αSMA免疫組織化學(xué)染色，觀測(cè)血管平滑肌細(xì)胞增值及遷移情況；進(jìn)行RT-PCR技術(shù)測(cè)定移植靜脈αSMA的變化。
　　結(jié)果：各組手術(shù)均成功，術(shù)后觀察移植靜脈搏動(dòng)有力，充盈良好。術(shù)后4周處死大鼠時(shí)，觀察移植靜脈情況，對(duì)照組一例閉塞，余血流通暢，對(duì)照組移植靜脈周圍有新鮮肉芽組織產(chǎn)生、不同程度的擴(kuò)張、管壁增厚水腫稍僵硬，涂抹膠水組皆可觀察到膠水未降解，移植靜脈周圍組織有少量肉芽組織易分

5、離，與周圍組織分界清晰，未見明顯擴(kuò)張。各組血清ET-1水平在0到36小時(shí)呈上升趨勢(shì)，假手術(shù)組在術(shù)后4周基本恢復(fù)術(shù)前水平，而對(duì)照組、膠水組、5-fu組術(shù)后4周仍維持在各自峰值水平。術(shù)前及術(shù)后即刻兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，各組水平相當(dāng)，術(shù)后36小時(shí)及術(shù)后4周各組水平開始出現(xiàn)差異：術(shù)后36小時(shí)及4周對(duì)照組、膠水組、5-fu組高于假手術(shù)組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；術(shù)后36小時(shí)及術(shù)后4周膠水組和5-fu組低于對(duì)照組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0

6、.05）；5-fu組術(shù)后36h水平低于膠水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。各組血清TNF-ɑ水平于術(shù)后即緩慢下降。對(duì)照組于術(shù)后36小時(shí)低于相對(duì)應(yīng)點(diǎn)的假手術(shù)組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；膠水組及5-fu組術(shù)后36小時(shí)高于對(duì)應(yīng)點(diǎn)的對(duì)照組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；5-fu組術(shù)后4周高于對(duì)應(yīng)點(diǎn)的對(duì)照組和膠水組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）； HE染色后通過計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。內(nèi)膜：對(duì)照組、膠水組、

7、5-fu組厚度均高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；5-fu組厚度低于假手術(shù)組、對(duì)照組、膠水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；膠水組的厚度低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。中膜：對(duì)照組厚度高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；膠水組、5-fu組厚度低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。外膜：對(duì)照組厚度高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；5-fu組厚度低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

8、p<0.05）。αSMA免疫組織化學(xué)染色可見假手術(shù)組術(shù)后4周內(nèi)膜及外膜可見少量陽性細(xì)胞；對(duì)照組術(shù)后4周內(nèi)中外膜均可見大量陽性細(xì)胞表達(dá)。膠水組可見中等量陽性細(xì)胞表達(dá)，以外膜居多；5-fu組內(nèi)膜陽性細(xì)胞表達(dá)少，外膜有中等量的表達(dá)?？梢妼?duì)照組大量平滑肌細(xì)胞遷移致內(nèi)膜并增生，膠水組可減少內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增生，平滑肌細(xì)胞向外膜遷移，5-fu組藥物干預(yù)后可明顯降低內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞的增生。術(shù)后4周取移植靜脈行RT-PCR對(duì)αSMA進(jìn)行檢測(cè)，M為MARK、