利用偽無菌小鼠研究腸道菌群在茶多酚減肥中的作用.pdf

1、腸道菌群與宿主肥胖密切相關(guān)，宿主肥胖又會引起低度慢性炎癥、引發(fā)高血壓、高血脂等相關(guān)心腦血管疾病。偽無菌小鼠動物模型是研究腸道菌群與肥胖及其他相關(guān)疾病關(guān)系的有利“工具”。20只8周齡C57BL/6J雄性小鼠給予抗生素混合物飲水，剔除大部分腸道微生物模擬無菌動物。隨機分成兩組：對照組（pgf CK）和高脂組（pgf HF），分別飼喂常規(guī)純化飼料與高脂純化飼料8周。以20只SPF級小鼠作對照，分為spf CK和spf HF組，分別飼喂常規(guī)純化

2、飼料與高脂純化飼料8周。常規(guī)方法測定小鼠體重、血清中血糖、血脂指標、胰島素水平，HE染色做小鼠附睪脂肪切片，利用Image-Pro Plus6.0圖像處理軟件計算脂肪細胞面積、長徑、短徑。
　　結(jié)果表明，與spf HF組小鼠相比，pgfHF組偽無菌小鼠的體重、脂肪墊、腎周脂重量顯著低于spf HF組小鼠（P<0.001）；胰島素水平、脂肪細胞大小也顯著低于spf HF組小鼠（P<0.01），pgfHF組偽無菌小鼠出現(xiàn)低體重低脂肪的

3、表型，與無菌小鼠動物模型特征一致。因此本課題采用抗生素處理建立偽無菌小鼠動物模型來預示無菌小鼠試驗的結(jié)果，進一步研究偽無菌小鼠和SPF小鼠對茶多酚減肥作用的響應差異。
　　利用茶多酚飼喂肥胖的SPF級小鼠和偽無菌小鼠，常規(guī)方法測定小鼠體重、血糖。采集小鼠的血清用放射性免疫技術(shù)和酶聯(lián)免疫法測定血脂指標、胰島素水平、炎癥水平；HE染色做小鼠附睪脂肪切片，利用Image-Pro Plus6.0圖像處理軟件計算脂肪細胞面積、長徑、短徑。<

4、br>　　結(jié)果顯示，0.8％茶多酚對SPF與偽無菌小鼠體重分別減輕7.7%和7.6%，1.6%茶多酚可減輕SPF與偽無菌小鼠體重分別達8.6%和10.8%。茶多酚干預后，肥胖的SPF小鼠與偽無菌小鼠空腹血糖極顯著下降（P<0.01），SPF級肥胖小鼠總膽固醇降低7.7%、甘油三酯含量降低26.51%，高密度脂蛋白膽固醇升高10.08%，而茶多酚對偽無菌小鼠甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇含量無顯著影響。茶多酚顯著抑制SPF級小鼠的脂肪細胞膨

5、大（P<0.01），脂肪組織形態(tài)接近于對照組。偽無菌小鼠的脂肪細胞面積、長徑、短徑均極顯著大于SPF級小鼠（P<0.001），脂肪細胞膨大現(xiàn)象未得到改善。
　　高脂飲食誘導SPF與偽無菌小鼠體內(nèi)促炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α水平升高、抗炎癥因子 IL-10水平下降；茶多酚干預后，SPF與偽無菌小鼠體內(nèi)炎癥得到改善，與茶多酚有劑量依賴關(guān)系。炎癥因子 IL-1、IL-6、TNF-α水平下降、IL-10水平上升；并且偽無菌小鼠

6、體內(nèi)IL-1、IL-6水平略低于SPF小鼠，IL-10水平較SPF小鼠略高。
　　高脂飲食后，SPF小鼠腸道厚壁菌門、放線菌門、變形菌門的細菌豐度顯著高于spf CK組。茶多酚干預后，放線菌門細菌豐度下降，厚壁菌門/擬桿菌門的細菌豐度比值降低?？股靥幚砗?，偽無菌小鼠腸道菌群多樣性降低，并且大量定植了疣微菌門的細菌，高脂飲食還引起腸桿菌、普氏菌的豐度提高、乳桿菌豐度下降等；經(jīng)過茶多酚調(diào)控，菌群結(jié)構(gòu)得到調(diào)整，阿克曼菌、乳桿菌豐度上升

7、，腸桿菌、普氏菌豐度下降甚至消失。
　　本研究結(jié)果表明，茶多酚可以控制SPF小鼠與偽無菌小鼠的體重增加、降低空腹血糖水平、提高胰島素敏感性、抑制脂肪累積還可以降低體內(nèi)炎癥水平；但是偽無菌小鼠與SPF小鼠對茶多酚減肥作用的響應具有明顯差異。高脂飲食導致小鼠腸道菌群紊亂，茶多酚調(diào)控后得到改善。即便偽無菌小鼠減肥效果不及SPF小鼠，但是經(jīng)過茶多酚調(diào)控的偽無菌小鼠較單純攝取高脂飲食的偽無菌小鼠體重、炎癥水平等均有所改善。說明腸道菌群是茶多