腸道菌群在維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系中的作用研究.pdf

1、結(jié)直腸癌是我國(guó)最常見的惡性腫瘤，近年來(lái)其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。針對(duì)病因采取有效措施可望明顯降低其發(fā)病率和疾病負(fù)擔(dān)。腸道菌群可能是影響維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系的重要因素。
　　目的：
　　探討腸道菌群多樣性在維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系中的作用。
　　方法：
　　采用Elisa試劑盒測(cè)定兩組人群的血漿25-羥維生素D濃度;免疫組化方法檢測(cè)結(jié)直腸癌人群病變切除組織及癌旁組織標(biāo)本的維生素D受體表達(dá)情況;兩組人群糞便標(biāo)本的細(xì)菌16S

2、 rDNA V3-V4區(qū)高通量測(cè)序，以評(píng)價(jià)腸道菌群結(jié)構(gòu)。采用病例對(duì)照研究資料分析方法，對(duì)兩組人群血漿25-羥維生素D水平進(jìn)行比較，同時(shí)，按照病變部位（近端結(jié)腸、遠(yuǎn)端結(jié)腸）、腸道菌群結(jié)構(gòu)（豐度和多樣性水平）及進(jìn)行分層分析。采用病例-病例-對(duì)照研究資料分析方法，探討維生素D受體表達(dá)、腸道菌群結(jié)構(gòu)與結(jié)直腸癌發(fā)病關(guān)系。綜合上述分析結(jié)果，探討和驗(yàn)證25-羥維生素D與結(jié)直腸癌發(fā)病關(guān)系。單因素使用t檢驗(yàn)或x2檢驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上采用logisitic回歸

3、分析。
　　結(jié)果：
　?。ㄒ唬┚S生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　1、結(jié)直腸癌組及健康對(duì)照組血漿25-羥維生素D水平比較
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.213)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、蔬菜、水果攝入、紅肉攝入、大蒜攝入、腌制食品攝入等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平《12.42ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平（≥15.75ng/mL）和

4、中等血漿25-羥維生素D水平（12.42-15.75ng/mL）的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為1.09(0.48，2.48)和0.73(0.30，1.76)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　2、近端結(jié)直腸癌組及健康對(duì)照組血漿25-羥維生素D水平比較
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.603)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、蔬菜、水果攝

5、入、吸煙和年齡等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平（≤12.42ng/mL）相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平(12.42-15.75ng/mL)的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為1.09(0.48，2.48)和0.73(0.30，1.76)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與近端結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　3、遠(yuǎn)端結(jié)直腸癌組及健康對(duì)照組血漿25-羥維生素D水平比

6、較
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.170)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、蔬菜、水果攝入、吸煙和腌制食品等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平(≤12.42ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平(12.42-15.75ng/mL)的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為1.14(0.48，2.88)和0.62(0.2

7、3，1.66)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與遠(yuǎn)端結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　?。ǘ┠c道菌群豐度指數(shù)在維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系中的作用
　　1、菌群豐度指數(shù)Chao、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.665)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、蔬菜、水果攝入、飲茶、吸煙和年齡等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平《12.42ng/

8、mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平（12.42-15.75ng/mL）的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為0.38(0.08，1.75)和0.88(0.20，3.90)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群高豐度(Chao＞306)的結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　2、菌群豐度指數(shù)Ace、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　結(jié)合Chao指數(shù)及Ace指數(shù)發(fā)現(xiàn)，血漿25-羥維生

9、素D水平與結(jié)直腸癌的發(fā)生并無(wú)相關(guān)性，并且其關(guān)系并不受菌群豐度高低的影響。
　?。ㄈ┠c道菌群多樣性在維生素D與及結(jié)直腸癌關(guān)系中的作用
　　1、菌群多樣性指數(shù)shannon、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.296)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、大蒜、蔬菜攝入、蛋類攝入因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平（≤12.42ng/mL）相比高

10、血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平(12.42-15.75ng/mL)的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為0.39(0.09，1.75)和0.85(0.20，3.70)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群高多樣性(shannon＞3.17)結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　2、菌群多樣性指數(shù)simpson、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D

11、水平無(wú)顯著差異(P=0.242)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、大蒜、蔬菜攝入、蛋類攝入因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平(≤12.42 ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平（12.42-15.75ng/mL）的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為0.65(0.16，2.70)和1.60(0.37，6.92)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群性高多樣性(sim

12、pson≤0.089)的結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　結(jié)合菌群多樣性指數(shù)simpson和simpson發(fā)現(xiàn)，血漿25-羥維生素D水平與結(jié)直腸癌的發(fā)生并無(wú)相關(guān)性，并且其關(guān)系并不受菌群多樣性高低的影響。
　　（四）腸道菌群Alpha多樣性在維生素D與結(jié)直腸腫瘤關(guān)系中的作用
　　1、菌群低Alpha多樣性、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.40

13、5)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、蔬菜攝入、體力勞動(dòng)情況等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平(≤12.42ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平（12.42-15.75ng/mL）的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為0.85(0.60，6.35)和1.94(0.25，2.89)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群低Alpha多樣性且VDR受體低表達(dá)的結(jié)直腸癌無(wú)

14、統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.196)。多因素結(jié)果顯示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、水果攝入、腌制食品攝入等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平(≤12.42ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平(12.42-15.75ng/mL)的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為1.64(0.11，3.77)

15、和0.63(0.21，12.73)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群低Alpha多樣性且VDR受體高表達(dá)的結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　2、菌群高Alpha多樣性、維生素D與結(jié)直腸癌關(guān)系
　　單因素分析結(jié)果顯示，血漿25-羥維生素D與菌群高Alpha多樣性且VDR受體低表達(dá)的結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞0.05)。
　　單因素分析結(jié)果顯示，兩組血漿25-羥維生素D水平無(wú)顯著差異(P=0.536)。多因素結(jié)果顯

16、示在控制血sTNFR2、內(nèi)毒素、水果攝入、腌制食品攝入等因素后，與最低等級(jí)的血漿25-羥維生素D水平《12.42ng/mL)相比高血漿25-羥維生素D水平(≥15.75ng/mL)和中等血漿25-羥維生素D水平（12.42-15.75ng/mL）的相對(duì)危險(xiǎn)度(95％CI)分別為2.75(0.44，17.30)和1.93(0.13，29.10)，說(shuō)明血漿25-羥維生素D與菌群高Alpha多樣性且VDR受體高表達(dá)的結(jié)直腸癌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(P＞