可溶性鳥(niǎo)甘酸環(huán)化酶激活劑cinaciguat對(duì)糖尿病大鼠大血管的保護(hù)作用.pdf

1、據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(international diabetes federation，IDF)最新統(tǒng)計(jì)顯示，目前全世界糖尿病患者已達(dá)3.82億（占全球總?cè)丝诘?.3％），預(yù)計(jì)到2035年將可能接近6億人次，其中超過(guò)3/4的患者將死于心血管并發(fā)癥。
　　cinaciguat作為一種新型的可溶性鳥(niǎo)甘酸環(huán)化酶(soluble guanylate cyclases，sGC)激活劑，其在心血管疾病及其他疾病的治療領(lǐng)域不斷被探索和發(fā)現(xiàn)。目前，

2、cinaciguat對(duì)急性心力衰竭、心肌缺血再灌注損傷、肺動(dòng)脈高壓、心肌肥厚，甚至骨質(zhì)疏松、高眼壓等疾病均具有明確的作用效果。cinaciguat現(xiàn)已成為醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)，主要的研究方向?yàn)樾难芊矫?，但是其具體作用機(jī)制及治療范圍尚未完全明確。糖尿病患者并發(fā)心血管疾病的比例較普通人群增加2～4倍，因此探索cinaciguat是否具有抗糖尿病大血管病變作用，對(duì)于降低糖尿病患者致死率、致殘率具有極其重要的意義。
　　目的：
　　本

3、實(shí)驗(yàn)以2型糖尿病大鼠為動(dòng)物模型，分析sGC激活劑cinaciguat對(duì)糖尿病大鼠氧化應(yīng)激、血脂代謝、血清內(nèi)皮素含量、胸主動(dòng)脈粘附分子表達(dá)以及大鼠胸主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變等的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)糖尿病大鼠大血管的保護(hù)作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.本研究采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)及腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型。
　　2.實(shí)驗(yàn)分組:將SD大鼠分為正常對(duì)照(NC

4、)組、單純糖尿病模型(DM)組和糖尿病+cinaciguat低、中、高劑量[3.5、7、14 ug/(kg·d)](DM+LC、DM+MC和DM+HC)五組。
　　3.經(jīng)下腔靜脈采血，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血脂指標(biāo)。
　　4.黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)血清總氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)活性、TBA法檢測(cè)丙二醛(malonaldehyde，MDA)含量，酶聯(lián)免疫檢測(cè)法(enzy

5、me linked immunosorbent assay，ELISA)試劑檢測(cè)血清內(nèi)皮素(endothelin-1,ET-1)含量。
　　5.對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈進(jìn)行蘇木紫-伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色，觀察各組大鼠胸主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變。
　　6.利用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)血管的細(xì)胞間粘附分子-1(intercellularadhesion molecule1,ICAM-1,CD106)和血管細(xì)胞間粘

6、附分子-1(vescular celladhesion molecule1,VCAM-1,CD54)蛋白的表達(dá)。
　　7.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real time PCR，RT-PCR)檢測(cè)ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.與DM組大鼠相比較，DM+LC、DM+MC和DM+HC組大鼠血糖值變化不明顯（均P＞0.05）;甘油三酯(triglycerides，

7、TG)和總膽固醇(total cholesterol，TC)含量均有明顯降低（均P＜0.05）。
　　2.與DM組大鼠相比較，DM+LC、DM+MC和DM+HC組大鼠T-SOD活性明顯升高，MDA和ET-1含量顯著降低（均P＜0.05）。
　　3.蘇木紫-伊紅(HE)染色顯示糖尿病模型組大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞脫落，平滑肌增殖和遷移，肌層明顯增厚，中膜斷裂;DM+LC、DM+MC和DM+HC組大鼠較之有所改善，結(jié)構(gòu)改變介于糖尿病

8、模型組和正常對(duì)照組之間。
　　4.與NC組大鼠相比較，DM組大鼠胸主動(dòng)脈中ICAM-1和VCAM-1蛋白含量和mRNA的表達(dá)均有顯著增高（P＜0.01或P＜0.05）;與DM組比較，DM+LC、DM+MC和DM+HC組胸主動(dòng)脈ICAM-1和VCAM-1蛋白含量和mRNA的表達(dá)明顯降低，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01或P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.cinaciguat可能具有調(diào)節(jié)血脂，降低糖尿病大鼠氧化應(yīng)激水平，