鋅對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用.pdf

1、目的：1．觀察糖尿病大鼠視網(wǎng)膜還原型谷胱甘肽和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛含量的變化以及鋅對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用。2．比較補(bǔ)鋅組與糖尿病大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，探討細(xì)胞凋亡在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床補(bǔ)鋅預(yù)防和治療糖尿病視網(wǎng)膜病變提供依據(jù)。 材料與方法：第一部分：72只Wistar大鼠(雌雄不限)，隨機(jī)分為正常對照組、糖尿病模型組以及氯化鋅治療組，每組24只，治療組和模型組腹腔注射鏈脲佐菌素(Stre

2、ptozotocin,STZ60mg／kg．bw)誘導(dǎo)糖尿病模型，治療組同時一次性腹腔注射氯化鋅1Omg／kg．bw，對照組注射緩沖液，觀察72小時。在處理后24、48、72小取血和組織，應(yīng)用分光光度法檢測胰腺、肝臟和視網(wǎng)膜還原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)；肝臟、胰腺和視網(wǎng)膜丙二醛(MaleicDialdehydeMDA)的測定采用TBA法；血清胰島素水平的檢測用放射免疫法。第二部分：24只健康、雄性Wistar大鼠隨機(jī)

3、分成三組，即正常對照組、糖尿病模型組和硫酸鋅治療組，糖尿病模型組的建立方法同第一部分，硫酸鋅治療組每天腹腔注射給鋅5mg／kg．bw，造模七周后處死實驗大鼠取材，用10％中性甲醛固定，石蠟切片，用于HE染色光鏡觀察視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)，TUNEL技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況，免疫組化SP法測定Bcl-2、Bax以及Caspase-3蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：1．正常大鼠各測量值為正常值；與正常組相比，模型組血糖值、視網(wǎng)膜和肝臟MDA含量

4、增高，24小時點(diǎn)胰島素水平升高，48和72小時則降低，胰腺、視網(wǎng)膜和肝臟GSH含量降低；治療組各時期測量指標(biāo)介于二者之間。2．HE染色光鏡觀察三組(正常組、糖尿病組和鋅治療組)大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)基本無差別，模型組細(xì)胞較其他兩組稍稀疏。3．模型組TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量較多，與正常組比較有顯著性差異(P<0．001)前者陽性細(xì)胞見于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層，而正常組TUNEL陽性細(xì)胞僅見于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層，鋅治療組TUNEL陽性表達(dá)明顯減

5、少(與模型組比較P<0．01)。4．模型組Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)量較正常組明顯減少，二者比較有顯著性差異(P<0．001)硫酸鋅治療組Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)量較多，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)。5．Bax以及Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)量在模型組較多，正常組僅有少量Bax陽性細(xì)胞，未見Caspase-3陽性細(xì)胞，二者比較有顯著性差異(P<0．001)硫酸鋅干預(yù)組Bax以及Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)量均明顯減少(與模型組比較P<