煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、I分類號：密級：UDC：學(xué)號：416523412241南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變保護(hù)作用及煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變保護(hù)作用及其機(jī)制的研究其機(jī)制的研究TheProtectiveRoleofNiacinonDiabeticRetinopathyitsMechanism陳果培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)附屬眼科指導(dǎo)教師姓名、職稱：易敬林教授主任醫(yī)師申請學(xué)位的學(xué)科門類：臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：眼科學(xué)論文答辯日期：2015年5月答

2、辯委員會主席：評閱人：2015年5月9日摘要II摘要目的：目的：觀察煙酸對鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿病視網(wǎng)膜病變是否具有保護(hù)作用，并探討相關(guān)的作用機(jī)制。方法：方法：健康雄性68周C57BL6J小鼠48只，隨機(jī)分為正常對照組、糖尿病造模組、煙酸干預(yù)組，每組16只。糖尿病造模組和煙酸干預(yù)組采用連續(xù)5天腹腔注射50mgkg鏈脲佐菌素(STZ)制作糖尿病小鼠模型，煙酸干預(yù)組在糖尿病模型4周月后喂食含煙酸(0.5%ww)4周，其余兩組喂食不含

3、煙酸的同樣食物。煙酸干預(yù)4周后，將小鼠深度麻醉，行心臟灌注去除血管中血液成分，摘取小鼠眼球，去除眼前節(jié)，然后進(jìn)行固定、蔗糖梯度脫水、包埋、冰凍切片，通過免疫熒光染色檢測各組視網(wǎng)膜中NADPH氧化酶4(Nox4)、NADPH氧化酶2(Nox2)、3硝基酪氨酸（3NT）和細(xì)胞間粘附分子（ICAM1）的表達(dá)情況；取視網(wǎng)膜組織通過蛋白免疫印跡技術(shù)檢測NADPH氧化酶4(Nox4)和NADPH氧化酶2(Nox2)蛋白含量表達(dá)情況的變化；蛋白免疫印

4、跡技術(shù)檢測各組小鼠視網(wǎng)膜滲漏的白蛋白含量及各組小鼠視網(wǎng)膜緊密連接蛋白ZO1和Occludin含量；熒光標(biāo)記的ConcanavalinA灌注染色檢測煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜血管白細(xì)胞粘附的影響；視網(wǎng)膜鋪片claudin5免疫熒光染色檢測各組小鼠視網(wǎng)膜中血管緊密連接破壞情況。結(jié)果：結(jié)果：免疫熒光染色顯示糖尿病組NADPH氧化酶4(Nox4)、3NT和ICAM1表達(dá)明顯升高，而煙酸處理組Nox4、3NT和ICAM1表達(dá)較糖尿病組下降；從蛋白水平上看

5、，糖尿病組Nox4和Nox2的含量較正常對照組明顯升高，煙酸作用后可逆轉(zhuǎn)這種升高，使Nox4和Nox2的表達(dá)下降；westernblot結(jié)果顯示糖尿病情況下視網(wǎng)膜中白蛋白含量較正常對照組顯著升高，而煙酸干預(yù)組視網(wǎng)膜中白蛋白含量較糖尿病組明顯降低；westernblot結(jié)果顯示糖尿病情況下視網(wǎng)膜緊密連接蛋白ZO1和Occludin含量較正常對照組顯著減少，而糖尿病后煙酸干預(yù)可使上述蛋白含量較糖尿病組明顯升高；白細(xì)胞粘附試驗(yàn)顯示糖尿病組小鼠