煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及機(jī)制的研究.pdf

1、分類號(hào)：分類號(hào)：密級(jí)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：學(xué)號(hào)：406521413488南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及機(jī)制的研究機(jī)制的研究TheProtectiveRoleofNiacininOxygeninducedRetinopathyitsMechanism張鳳俊張鳳俊培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)附屬眼科醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：易敬林教授申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)碩士學(xué)

2、科專業(yè)名稱：眼科學(xué)論文答辯日期：2016年5月答辯委員會(huì)主席：周瓊評(píng)閱人：盲審2016年5月摘要摘要目的目的：觀察煙酸對(duì)氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變是否具有保護(hù)作用，并探索其相關(guān)的機(jī)制。方法方法：建立氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病變模型：出生第7天（P7）C57BL6J新生小鼠80只隨機(jī)均分為常氧對(duì)照組（RA）、常氧煙酸干預(yù)組（RANiacin）、單純氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變組（OIR）和OIR煙酸干預(yù)組（OIRNiacin），每組20只。兩組OIR新生小

3、鼠P7連同母鼠放入75%1%氧濃度的氧艙中，P12取出放回正常空氣中再飼養(yǎng)5天，煙酸干預(yù)組母鼠飼以含質(zhì)量比0.5%煙酸的飼料，從幼鼠P7時(shí)開始喂食母鼠至P17。煙酸為水溶性維生素，可通過乳汁分泌，幼鼠按需吸允含有煙酸的乳汁。各組新生小鼠均于P17深度麻醉后經(jīng)含肝素PBS心臟灌注去除視網(wǎng)膜血管中血液后取右眼提取完整視網(wǎng)膜凍于80℃冰箱保存，取左眼固定后行石蠟包埋、OCT包埋、視網(wǎng)膜鋪片IsolectinIB4染色。免疫熒光檢測(cè)各組新生小鼠

4、視網(wǎng)膜中3硝基酪氨酸（3NT）、對(duì)氧磷酶2（PON2）和膠質(zhì)細(xì)胞纖維酸性蛋白（GFAP）表達(dá)；熒光探針CellROXGreen氧化應(yīng)激試劑檢測(cè)各組活性氧自由基(ROS)水平；石蠟切片HE染色定量突破內(nèi)界膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)目；熒光標(biāo)記的IsolectinIB4視網(wǎng)膜鋪片染色觀察各組小鼠全視網(wǎng)膜中央缺血無灌注區(qū)（VO）和病理性新生血管區(qū)（NV）變化；TUNEL染色檢測(cè)視網(wǎng)膜組織細(xì)胞凋亡情況；Westernblot測(cè)定各組視網(wǎng)膜組織中血管

5、內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、低氧誘導(dǎo)因子（HIF1a）、PON2和GFAP的表達(dá)，并通過檢測(cè)白蛋白Albumin的表達(dá)評(píng)判各組視網(wǎng)膜血管滲漏情況。結(jié)果結(jié)果：免疫熒光染色顯示OIR組視網(wǎng)膜GFAP標(biāo)記的mller細(xì)胞活化，煙酸可逆轉(zhuǎn)GFAP表達(dá)的增加；同樣熒光顯示，PON2在視網(wǎng)膜mller細(xì)胞上有表達(dá)，煙酸可進(jìn)一步上調(diào)PON2的表達(dá)起到抗氧化作用；HE染色和IB4血管染色結(jié)果表明，煙酸可抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜血管異常；從蛋白水平上看，煙酸同