?；撬釋μ悄虿≡缙诖笫笠暰W(wǎng)膜氧化損傷的保護作用.pdf

1、研究背景：糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy，DR）是糖尿?。╠iabeticmellitus，DM）最重要的并發(fā)癥之一，其病因和發(fā)病機制錯綜復(fù)雜。臨床上防治DR 以控制血糖、抑制血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growthfactor，VEGF)表達、拮抗蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)的活化、減少糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end p

2、roducts，AGEs)的生成及阻斷多元醇代謝通路等為主要手段，但效果并不理想，目前尚缺乏根治性的療法。近年研究表明，氧化應(yīng)激(oxidative stress，OS)是DR 不同發(fā)病機制共同的起始途徑，為藥物干預(yù)DR 提供了思路，但對干預(yù)效果尚存在爭議。本研究探討?；撬?taurine，tau)早期干預(yù)防治DR 的效果。 目的：觀察?；撬釋M 早期大鼠視網(wǎng)膜氧化損傷的保護作用，探討藥物作用機制，為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

3、 方法：選擇75 只正常Wistar 大鼠，隨機分為正常對照組(normal control，CON 組)、糖尿病組(diabetes group ，DM 組)、糖尿病牛磺酸治療組(taurine-treated group，D+Tau 組)和糖尿病維生素E 治療組(vitamin E-treatedgroup，D+VE 組)等4 組。采用腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)的方法建立DM 模型。將?；撬峒熬S生

4、素E 用0.5％羧甲基纖維素鈉分別配制成濃度為3％和1％的溶液。D+Tau 組和D+VE 組按10ml/kg 體重分別給予?；撬岷途S生素E 溶液灌胃，每日一次；CON 組和DM 組大鼠每日相同時間灌服相應(yīng)體積的0.5％羧甲基纖維素鈉，實驗為期8 周。采用葡萄糖氧化酶法測定血糖，蘇木素-伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色和透射電鏡觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變，化學(xué)比色法檢測視網(wǎng)膜組織中丙二醛(malondialdehyd

5、e，MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性，免疫組織化學(xué)染色觀察視網(wǎng)膜組織中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthetase，iNOS)的表達情況。 結(jié)果：經(jīng)腹腔一次性注射STZ 60mg/kg 后72 小時，成功地建立了以高血糖為特征的Wistar 大鼠DM 模型，模型成功率為83.33％。治療前DM 組、D+Tau 組及D+VE 組血糖較C

6、ON 組明顯升高(P＜0.01)，但三組間血糖無明顯差異(P＞0.05)。CON 組、DM 組和D+VE 組大鼠治療前、后血糖無明顯改變(P＞0.05)；D+Tau 組大鼠治療后血糖明顯低于治療前水平(P＜0.05)。治療結(jié)束時，D+Tau 組大鼠血糖低于DM 組(P＜0.05)，但仍較CON 組高(P＜0.01)；D+VE 組與DM 組相比未見明顯差異。治療8 周后，與CON 組比較，DM 組大鼠視網(wǎng)膜感光細胞外節(jié)膜盤排列紊亂；內(nèi)核層

7、細胞和神經(jīng)節(jié)細胞水腫，線粒體變性，細胞核固縮；神經(jīng)纖維軸突水腫，胞器減少；毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹變形，管腔明顯狹窄。D+Tau 組較DM 組視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)改變明顯減輕，主要表現(xiàn)為神經(jīng)節(jié)細胞輕度變性，胞器水腫好轉(zhuǎn)。D+VE 組較DM 組視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)改變有所減輕，但仍較D+Tau 組重，主要表現(xiàn)為內(nèi)核層細胞和神經(jīng)節(jié)細胞水腫，線粒體腫脹，可見空泡樣變性。與CON 組相比，DM 組大鼠視網(wǎng)膜MDA 含量升高了317.39％(P＜0.01)，SO

8、D 活性下降了25.42％(P＜0.01)。 與DM 組比較，D+Tau 組視網(wǎng)膜組織MDA 含量降低了67.14％(P＜0.01)，SOD活性升高了25.10％(P＜0.01)；D+VE 組視網(wǎng)膜組織MDA 含量降低了30.40％(P＜0.01)，SOD 活性升高了24.59％(P＜0.01)。D+Tau 組視網(wǎng)膜組織中MDA 含量較D+VE 組降低更為明顯(P＜0.01)。免疫組化染色顯示，CON組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)有極少量的iN

9、OS 陽性細胞，散在分布于神經(jīng)節(jié)細胞層，陽性細胞平均數(shù)為1.75±0.72；與CON 組相比，DM 組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)iNOS 陽性細胞顯著增多(P＜0.01)，陽性細胞主要集中于神經(jīng)節(jié)細胞層，少量散在分布于內(nèi)核層，陽性細胞平均數(shù)為25.20±0.84；與DM 組相比，D+Tau 組及D+VE 組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)iNOS 陽性細胞數(shù)明顯減少(P＜0.01)，陽性細胞僅存在于神經(jīng)節(jié)細胞層，陽性細胞平均數(shù)分別為13.07±0.93 和14.15±0