牛磺酸對(duì)2型糖尿病小鼠肝損傷的影響.pdf

1、目的：通過(guò)觀察?；撬幔═aurine）對(duì)2型糖尿病小鼠肝損傷和線粒體融合蛋白2（Mitofusin2，Mfn2）、動(dòng)力相關(guān)蛋白1（Dynamic related protein-1，Drp-1)、分裂蛋白1（Fission protein1，F(xiàn)is-1）、糖基化終末產(chǎn)物（Advanced glycation end products，AGEs）和糖基化終末產(chǎn)物受體（The receptor for advanced glycation

2、end products，RAGE）表達(dá)的影響，探討線粒體的分裂/融合對(duì)2型糖尿病小鼠肝損傷的影響，為臨床防治2型糖尿病和其并發(fā)癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：隨機(jī)選取12只年齡、性別相匹配的13周齡雌性db/db小鼠分為Taurine處理組和溶劑處理（VEH）組，選取6只表型正常的db/m小鼠（lepr-/m）作為對(duì)照組。Taurine處理組給小鼠腹腔注射Taurine200mg/kg/day，溶劑處理組和對(duì)照組給予生理鹽水，連續(xù)2

3、0天監(jiān)測(cè)小鼠體重、血糖變化。測(cè)量血清甘油三酯（TG）、總膽固醇(TC)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）數(shù)值，血漿糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）水平；檢測(cè)肝組織丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）的含量，超氧化物歧化酶（SOD）、黃嘌呤氧化酶（XOD）的活力，肝組織TG和TC含量；光鏡觀察肝臟組織形態(tài)改變；采用油紅O染色觀察肝臟組織脂質(zhì)沉積情況；應(yīng)用 TUNEL法檢測(cè)肝組織細(xì)胞凋亡情況；采用免疫組織化學(xué)法（immun

4、ohistochemistry，IHC）觀察肝組織 Mfn2、Drp1、Fis1、AGEs和RAGE蛋白的表達(dá)，應(yīng)用real time-PCR方法檢測(cè)肝組織Mfn2和Fis1 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：1各組動(dòng)物體重及血糖、血脂和肝功能的變化與對(duì)照組相比，模型組動(dòng)物體重、空腹血糖明顯增加，血清 ALT、AST、TC、TG、血漿 AGEs及肝臟 TC、TG明顯增高（P<0.05）；與模型組相比，給藥組動(dòng)物血清 ALT、AST、血漿

5、AGEs和肝臟TC、TG明顯降低（P<0.05），而血清TG、TC雖有些變化，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。2肝組織形態(tài)學(xué)改變光鏡下可見模型組肝細(xì)胞水腫，胞質(zhì)疏松淡染和氣球樣變，細(xì)胞排列紊亂擁擠，肝竇受壓變窄，肝細(xì)胞內(nèi)可見較多脂滴，間質(zhì)少許炎細(xì)胞浸潤(rùn)。油紅 O染色可見大量紅染小脂滴。與模型組相比，給藥組光鏡下肝細(xì)胞水腫減輕，炎細(xì)胞浸潤(rùn)減少，偶見脂肪變性；油紅 O染色顯示肝細(xì)胞偶見脂滴。3肝組織細(xì)胞凋亡 TUNEL染色結(jié)果顯示模型組肝

6、組織細(xì)胞凋亡較多，可見細(xì)胞核呈棕黃色；給藥組細(xì)胞凋亡明顯減輕。4氧化應(yīng)激相關(guān)因子水平檢測(cè)與對(duì)照組相比，模型組 MDA、ROS含量顯著增多，XOD活性升高，SOD活性降低顯著（P<0.05）；與模型組相比，給藥組 MDA、ROS含量減少，XOD活性降低、SOD活性增高（P<0.05）。5肝臟組織 Mfn2、Drp1、Fis1、AGEs和RAGE蛋白表達(dá)免疫組織細(xì)胞化學(xué)顯示，與對(duì)照組相比，模型組 Mfn2蛋白表達(dá)降低，Drp1、Fis1、A

7、GEs和RAGE蛋白表達(dá)明顯增加（P<0.05）；與模型組相比，給藥組肝組織內(nèi) Mfn2蛋白表達(dá)增加，Drp1、Fis1、AGEs和RAGE蛋白表達(dá)減少（P<0.05）。6 Mfn2、Fis1的檢測(cè)采用real-time PCR檢測(cè)Mfn2、Fis1mRNA的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組相比，Mfn2表達(dá)減少，F(xiàn)is1表達(dá)明顯增多（P<0.05）；給藥組與模型組相比，Mfn2表達(dá)增多，F(xiàn)is1表達(dá)減少（P<0.05）。