β-乳球蛋白與表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯制備納米粒及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)作為綠茶葉含量最多且起主要生理功能的茶多酚，其具有抗氧化、抗誘變、抗菌，抗病毒、減肥等活性，對(duì)癌癥、心血管疾病、糖尿病、炎癥等也具有很好的治療作用。然而EGCG性質(zhì)很不穩(wěn)定，具有較低的生物利用率，這些缺陷嚴(yán)重限制了該物質(zhì)在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用。納米技術(shù)作為一種行之有效的方法可以保護(hù)芯材免于遭受環(huán)境的破壞，其作為高效的藥物載體，具有位點(diǎn)特異性，不易產(chǎn)生多重抗藥性等特點(diǎn)，其在疾病防治中具有重要的作用。β

2、-乳球蛋白是由反芻動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞分泌的重要的水溶性乳清蛋白，可以作為一種優(yōu)良的納米載體與白藜蘆醇、姜黃素、ω-3多不飽和脂肪酸相結(jié)合以提高其穩(wěn)定性和生物利用率。
　　 本文以β-LG為納米載體，與EGCG制備了β-LG-EGCG納米粒，研究其對(duì)EGCG抗氧化活性的保護(hù)作用及抗腫瘤活性的增效作用。研究發(fā)現(xiàn)溶液不同pH(2.5-7.0)，β-LG的不同加熱溫度(30-85℃)，β-LG/EGCG不同摩爾比例(1∶2-1∶32)以及

3、蛋白濃度(1-10mg/mL)對(duì)β-LG-EGCG納米粒的粒徑、Zeta電位、包埋率及載藥量具有顯著影響。當(dāng)pH值為6.4-7.0，熱激溫度為70-85℃，β-LG與EGCG可以形成穩(wěn)定，澄清及高載藥量的納米分散體。運(yùn)用紅外光譜技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)β-LG-EGCG納米粒與β-LG具有相似的二級(jí)結(jié)構(gòu)，熱誘導(dǎo)沒(méi)有破壞蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)。利用透射電鏡觀察β-LG-EGCG納米粒及β-LG呈白色球狀結(jié)構(gòu)。中性條件，β-LG/EGCG摩爾比例為1∶2，熱激

4、溫度85℃，β-LG對(duì)EGCG的緩釋效果及EGCG的抗氧化活性保護(hù)作用較好。通過(guò)體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)不同條件制備的β-LG-EGCG納米粒(LENP1，LENP2，LENP3，LENP4，LENP5，LENP6，LENP7)的抗腫瘤活性。相對(duì)于等劑量的自由EGCG，ELNP3和ELNP6能夠顯著增加小鼠肝癌細(xì)胞株H22細(xì)胞及荷瘤小鼠的腫瘤抑制率。此外，ELNP6能夠顯著提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。本研究結(jié)果表明，β-LG可作為納米載體