精氨酸加壓催產素在無蹼壁虎腦的晝夜節(jié)律性表達研究.pdf

1、生物的許多生化、生理和行為指標都呈現(xiàn)晝夜性的波動，這種接近24小時周期變化的生物節(jié)律稱為晝夜節(jié)律。生物體的晝夜節(jié)律性受晝夜節(jié)律鐘（circadian clock）控制。以往的觀點認為爬行動物晝夜節(jié)律鐘最重要的中樞是松果體及視網(wǎng)膜，所以研究者主要把精力放在松果體和視網(wǎng)膜上。近年的研究表明，同時損傷側眼（視網(wǎng)膜）、松果體（腺）后，多數(shù)蜥蜴類爬行動物的生理功能及行為等仍具有明顯晝夜節(jié)律性（Innocenti，1993;Berk and Hea

2、th，1975;Tosini and Menaker，1998），而損傷下丘腦的某些核團可以完全破壞某些爬行動物的晝夜節(jié)律，因此多數(shù)學者認為下丘腦可能也是爬行動物晝夜節(jié)律鐘重要的震蕩器。垂體后葉激素是一類廣泛存在于脊椎動物各等級類群的古老激素，在哺乳動物中目前認為精氨酸加壓素（arginine vasopressin，AVP）為生物鐘的重要而穩(wěn)定的輸出信號和整合信號（Hofman，2003; Dunlap，1999; Hastingse

3、tal，2003; Maria，2003），在不同光周期下其在視交叉上核均呈現(xiàn)特征性的晝夜節(jié)律性表達。那么精氨酸加壓催產素（argininevasotocin，AVT）作為精氨酸加壓素在爬行動物的同源物，其在無蹼壁虎（Gekko swinhonis）下丘腦是否表達？其表達是否呈現(xiàn)晝夜節(jié)律性？不同的光周期及不同溫度下其表達是否有變化呢？
　　運用免疫組織化學和數(shù)學形態(tài)學方法，我們發(fā)現(xiàn)在無蹼壁虎全腦AVP免疫陽性細胞主要分布在魯卡斜角

4、帶核、視上核、室旁核，在室周視前區(qū)、終紋床核，下丘腦外側區(qū)、前腦外側束、室周核出現(xiàn)零散的幾個細胞;陽性細胞形態(tài)多樣，呈圓形、梨形、或雙極形，但多以圓形為主，免疫染色主要位于細胞質和細胞突起，細胞核不著色或淺著色。而AVP免疫陽性纖維除了在嗅球、嗅束、大腦皮層、視葉、小腦皮層未見外，幾乎貫穿全腦其他部位。
　　在進行全腦AVP免疫陽性細胞定位和纖維投射觀察的基礎上，我們選取了在所有報道的爬行動物均有AVT表達的兩個核團（視上核與室旁

5、核）進行了數(shù)學形態(tài)學分析。在DD、DL、LL三種不同的光周期下分別統(tǒng)計了視上核與室旁核在7:00，11:00，15:00，19:00，23:00，3:00六個時間點AVP免疫陽性細胞的數(shù)目，結果發(fā)現(xiàn)在視上核陽性細胞數(shù)目沒有顯著變化，而室旁核在三種不同的光周期下AVP免疫陽性細胞的數(shù)目均呈現(xiàn)晝夜節(jié)律性變化。打破冬眠期組（環(huán)境溫度12±3℃）在DD和LL光周期下，晝夜節(jié)律變化曲線基本一致，均在15:00與19:00左右形成一個高峰，在3:0

6、0左右形成一個小高峰，而兩個波谷則分別出現(xiàn)在7:00和23:00，與DL光周期相比時相均提前了約4個小時，而且振幅相對較大;活動期組（環(huán)境溫度25±3℃）DD與LL的曲線趨勢也基本一致，均在19:00左右形成一個高峰，在3:00左右形成一個小高峰，而兩個波谷則出現(xiàn)在7:00和23:00，與DL相比，DD與LL的時相也向前提前了約4小時，這提示AVT的晝夜節(jié)律表達可能是一種內源性現(xiàn)象，而光則可能作為調整因子參與這種晝夜節(jié)律與外界環(huán)境的同步