擬南芥CIPK1基因功能的初步研究.pdf

1、在擬南芥中存在一類鈣調(diào)素B蛋白家族(calcineurin B-like proteins,CBL)，它的靶蛋白是一類具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白，被稱為CIPK (CBL-interacting protein kinase)。最近的研究表明，CBLs與CIPKs家族可能在植物對(duì)逆境應(yīng)答的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起重要作用，但CIPK1基因在脅迫信號(hào)中的反應(yīng)還未見(jiàn)報(bào)道。本研究從擬南芥中克隆CIPK1基因，并篩選其突變體，首次探討了CIPK1

2、在ABA（脫落酸）控制種子萌發(fā)信號(hào)途徑中的作用，論文的具體研究結(jié)果如下： 以持家基因β-actin作為內(nèi)參，利用RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄PCR）檢測(cè)擬南芥CIPK1基因在擬南芥不同器官中的表達(dá)，以及不同激素對(duì)此基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。結(jié)果表明：CIPK1基因在擬南芥的根、莖、葉、花和果莢中均有表達(dá)，其中在莖和花中表達(dá)量最高，在葉中表達(dá)量最低；ABA處理1h，CIPK1基因的表達(dá)量達(dá)到最高峰；GA處理初期則抑制該基因的表達(dá)，處理2h后表達(dá)量逐

3、漸恢復(fù)到未處理時(shí)的水平；2,4-D和6-BA處理也可使該基因表達(dá)量微弱增加；由此可以推斷CIPK1基因的表達(dá)具有組織特異性，并且主要與ABA密切相關(guān)，與其它激素關(guān)系不大。 為了更好的理解CIPK1基因在ABA信號(hào)傳導(dǎo)中的作用，我們首先用Gateway的方法對(duì)CIPK1基因進(jìn)行克隆，然后轉(zhuǎn)化到野生型中，用Basta篩選3代后，得到了該基因表達(dá)量明顯下降的共抑制轉(zhuǎn)基因cipk1突變體；對(duì)ABA處理下野生型和突變體的萌發(fā)率進(jìn)行測(cè)量，發(fā)