基于量子點(diǎn)的α1腎上腺素受體熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及其在活細(xì)胞中的初步應(yīng)用.pdf

1、本論文主要分為四部分：Ⅰ．緒論。Ⅱ．喹唑啉-量子點(diǎn)熒光探針的合成與表征。Ⅲ.去氧腎上腺素-量子點(diǎn)熒光探針的合成與表征。Ⅳ.量子點(diǎn)熒光探針在活細(xì)胞中的初步應(yīng)用。
　　 Ⅰ．在論文的第一部分，首先對(duì)單細(xì)胞單分子研究的意義、方法和進(jìn)展做了簡(jiǎn)單的介紹。其次對(duì)α1腎上腺素受體及其研究進(jìn)展以及發(fā)展最好，最具前途的熒光分析方法進(jìn)行了綜述，并對(duì)熒光分析法中常用的傳統(tǒng)有機(jī)染料、綠色熒光蛋白和新型半導(dǎo)體納米顆粒-量子點(diǎn)進(jìn)行了對(duì)比綜述。介紹了量子點(diǎn)新

2、型探針在生命科學(xué)中的應(yīng)用，以及常用的熒光檢測(cè)技術(shù)，重點(diǎn)介紹了全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)。
　　 Ⅱ．論文的第二部分針對(duì)α1腎上腺素受體拮抗劑喹唑啉類藥物的特點(diǎn)，設(shè)計(jì)并合成了可以與量子點(diǎn)進(jìn)行連接并形成特異性親和α1腎上腺素受體的熒光探針。為了使連接后的藥物小分子更接近其本來的動(dòng)力學(xué)特性，減少量子點(diǎn)帶來的空間位阻，我們將藥物小分子和量子點(diǎn)之間增加了一條PEG連接鏈。合成部分則分為N-羥基琥珀酰亞胺生物素酯的合成，2-(1-哌嗪)-4-氨基-

3、6，7-二甲氧基喹唑啉的合成，功能化聚乙二醇H2N-PEG-COOH的合成，2-（1-哌嗪）-4-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉的生物素化以及喹唑啉-量子點(diǎn)探針的合成等六部分，最后的合成產(chǎn)物使用1H NMR和基質(zhì)輔助-激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜來確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
　　 Ⅲ．論文的第三部分是使用α1腎上腺素受體激動(dòng)劑去氧腎上腺素對(duì)量子點(diǎn)進(jìn)行修飾，因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)與拮抗劑相比具有較活潑的氨基，與PEG的連接基團(tuán)也不相同，所以合成的路線和方法也不同。實(shí)

4、驗(yàn)首先對(duì)去氧腎上腺素分子中的活潑氨基進(jìn)行了保護(hù)，保護(hù)試劑為常用的氨基保護(hù)試劑——二碳酸二叔丁酯，該保護(hù)基團(tuán)在合成后使用三氟乙酸除去，副產(chǎn)物為CO2，不會(huì)對(duì)合成產(chǎn)生新的雜質(zhì)。合成產(chǎn)物使用1H NMR和基質(zhì)輔助-激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜來確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
　　 Ⅳ.最后一部分結(jié)合全內(nèi)反射熒光顯微鏡對(duì)合成的喹唑啉-量子點(diǎn)探針在活細(xì)胞中的應(yīng)用做了初步地探討。結(jié)果顯示，表達(dá)α1腎上腺素受體的細(xì)胞表面親和了大量的熒光探針量子點(diǎn)，而沒有表達(dá)α1腎上腺