量子點(diǎn)熒光探針的制備及其在細(xì)胞和活體成像中的應(yīng)用.pdf

1、量子點(diǎn)(quantum dots，QDs)是能夠激發(fā)出熒光的納米晶體，它們具有獨(dú)特的光學(xué)特性:熒光波長可通過改變粒徑大小和組成進(jìn)行調(diào)節(jié)，熒光強(qiáng)，光穩(wěn)定性好，激發(fā)光譜廣和發(fā)射熒光光譜窄等。自從1998年量子點(diǎn)在生物學(xué)上的應(yīng)用首次報(bào)道以來，量子點(diǎn)已在生物分子、細(xì)胞及活體熒光成像，生物傳感，腫瘤標(biāo)志物檢測等生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
　　 本文研究了Au摻雜可見-近紅外量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)及細(xì)胞毒性，量子點(diǎn)熒光探針在細(xì)胞及活體成像中的應(yīng)用

2、。利用量子點(diǎn)熒光探針進(jìn)行腫瘤靶向多光譜成像，成功地進(jìn)行了多光譜信號分離，實(shí)現(xiàn)了多重腫瘤標(biāo)志物同時(shí)進(jìn)行活體檢測。本文主要研究內(nèi)容如下:
　　 首次將Au摻雜到半導(dǎo)體熒光量子點(diǎn)。采用谷胱甘肽和半胱氨酸作穩(wěn)定劑，水相法合成Au∶CdTe量子點(diǎn)。用所合成的量子點(diǎn)作探針對活細(xì)胞進(jìn)行熒光成像，它們被細(xì)胞攝取進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，并長期非損傷性標(biāo)記活細(xì)胞。所合成的Au∶CdTe量子點(diǎn)具有較好的光穩(wěn)定性、細(xì)胞親和性，細(xì)胞毒性較小，適合活細(xì)胞長期無損傷標(biāo)記

3、和熒光成像。
　　 制備了生物發(fā)光能量共振轉(zhuǎn)移量子點(diǎn)偶聯(lián)物，成功應(yīng)用于小動物活體成像。在大腸桿菌表達(dá)和純化了海腎熒光素酶(RLuc8)，獲得較好的酶活性。將純化的RLuc8與RGD肽修飾的水溶性CdTe量子點(diǎn)連接，制備了自發(fā)光RGD-QD-RLuc8偶聯(lián)物，并成功地應(yīng)用于小鼠活體腫瘤靶向成像。證明所制備的生物發(fā)光RGD-QD-RLuc8偶聯(lián)物適合用作腫瘤標(biāo)記與活體成像的生物探針。
　　 建立了“一步合成”量子點(diǎn)-生物靶向

4、分子偶聯(lián)物的方法，并將制備的偶聯(lián)物成功地應(yīng)用于活體腫瘤靶向成像。采用Cys-RGD肽和半胱氨酸做穩(wěn)定劑，在水相中直接合成具有RGD肽連接的近紅外水溶性CdHgTe量子點(diǎn)(RGD-CdHgTe)，用PEG修飾RGD-CdHgTe量子點(diǎn)，并將近紅外PEG-QD-RGD(770 nm)成功地應(yīng)用于活體腫瘤靶向成像。表明這種“一步合成”的量子點(diǎn)-RGD肽偶聯(lián)物具有較好的腫瘤靶向性，并且在活體內(nèi)具有較好的信號強(qiáng)度，適合活體成像，在活體成像及腫瘤檢

5、測方面具有應(yīng)用潛力。
　　 首次合成近紅外Au∶CdHgTe量子點(diǎn)，并成功地用于活體腫瘤靶向多光譜熒光成像。對所合成的量子點(diǎn)進(jìn)行了表征，并測定了光穩(wěn)定性、組織穿透度及細(xì)胞毒性等，結(jié)果表明所合成的量子點(diǎn)具有增強(qiáng)的熒光，較好的光漂白抗性，較低的細(xì)胞毒性，生物組織穿透能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。用所合成的量子點(diǎn)分別與RGD肽、抗CEACAM1抗體、抗EGFR抗體連接，制備了Au∶CdHgTe量子點(diǎn)-生物分子偶聯(lián)物熒光探針，進(jìn)一步，同時(shí)利用三種熒光探