乳化異氟醚在小型豬全身麻醉中應(yīng)用及其麻醉機(jī)理研究.pdf

1、小型豬作為模式化動物在實驗外科領(lǐng)域占據(jù)著重要位置，小型豬常被應(yīng)用在人類解剖學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、藥物篩選、疾病模型篩選、疾病發(fā)生機(jī)理、器官移植和胚胎移植等方面的研究。在進(jìn)行與小型豬密切相關(guān)的課題時常常需要對其進(jìn)行保定或進(jìn)一步手術(shù)，所以小型豬的麻醉是進(jìn)行相關(guān)研究工作的基礎(chǔ)，小型豬麻醉成功、安全和藥物選擇、人員操作技術(shù)水平有直接關(guān)系，麻醉效果決定科研實驗?zāi)芊襁M(jìn)順利開展。目前，在豬臨床麻醉中使用的麻醉劑種類繁多，給藥途徑有很多種，而且根據(jù)不同

2、品系又開發(fā)出了特異性麻醉制劑。綜合評價這些麻醉劑及其用藥方式，可以發(fā)現(xiàn)它們有各自的優(yōu)缺點。比如，肌肉注射麻醉劑需一次性注射足夠劑量的麻醉劑，才能保證有穩(wěn)定的麻醉時間和麻醉效果，但是其麻醉誘導(dǎo)時間和維持時間較長，麻醉深度無可控性;靜脈麻醉具有作用迅速，麻醉深度可控等優(yōu)點，但往往需要麻醉誘導(dǎo)，并且維持過程需要調(diào)整多種藥物的注射，操作較繁瑣;吸入麻醉相對可以提供可控的麻醉時間和麻醉效果，但其需特殊吸入麻醉設(shè)備并且要求技術(shù)人員具有熟練的操作技術(shù)

3、?；谀壳奥樽憩F(xiàn)狀，本課題組進(jìn)行小型豬新型麻醉方法的探索，將液態(tài)異氟醚融入脂肪乳通過靜脈注射方式進(jìn)行小型豬全身麻醉，前期研究發(fā)現(xiàn)此麻醉劑具有以下優(yōu)點:一、經(jīng)靜脈給藥將麻醉藥直接經(jīng)血液循環(huán)進(jìn)行血腦屏障到達(dá)麻醉作用部位而快速產(chǎn)生麻醉作用;二、可通過調(diào)節(jié)靜脈輸注速度來調(diào)節(jié)麻醉深度，停藥后蘇醒迅速;三、從血中排出到肺泡中的揮發(fā)性麻醉藥可以經(jīng)肺泡重新吸收入血，以減少靜脈麻醉藥用量，用藥量是吸入麻醉用量的1/3-1/4;四、不需要揮發(fā)罐，減少臨床繁

4、瑣操作步驟，可使麻醉費用降低;五、乳化制劑對動物心肌具有保護(hù)作用。
　　 為了探究乳化異氟醚在小型豬全身麻醉上應(yīng)用的可行性，進(jìn)行了全身麻醉最佳靜脈注射速度篩選、麻醉效果和安全性評價試驗，麻醉過程中監(jiān)測的指標(biāo)有，常規(guī)指標(biāo)、生物反射、麻醉效果、呼吸系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、心電圖和腦電圖。為了進(jìn)一步闡述其全身麻醉分子機(jī)理，進(jìn)行了相關(guān)實驗。首先，對麻醉前后各腦區(qū)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中突觸體Na+-K+-ATP酶、Ca2+、Mg2+-ATP酶以及NO-N

5、OS-cGMP信號通路各組分的活性和含量變化進(jìn)行測定;其次，通過免疫組織化學(xué)方法把麻醉前后各腦區(qū)NMDAR和nAChR陽性細(xì)胞分布和表達(dá)情況進(jìn)行測定;再次，通過蛋白質(zhì)印跡法檢測c-fos和c-jun基因蛋白在不同腦區(qū)的表達(dá)情況。
　　 試驗結(jié)果如下:
　　 1.小型豬乳化異氟醚麻醉最小輸注率篩選試驗
　　 小型豬以臨床劑量丙泊酚進(jìn)行麻醉誘導(dǎo)，乳化異氟醚靜脈注入維持麻醉，通過序貫法和自身交叉法確定最佳注射速度為2.

6、8mL/kg.h。
　　 2.小型豬乳化異氟醚麻醉監(jiān)測實驗
　　 小型豬以最小輸注率進(jìn)行麻醉，在麻醉過程進(jìn)行一般生理指標(biāo)、呼吸和循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)、心電和腦電圖監(jiān)測，結(jié)果表明，乳化異氟醚具有理想的麻醉效果，并且對生理指標(biāo)、呼吸和循環(huán)指標(biāo)影響輕微，心功能無異常，腦電圖波型提示小型豬處于適宜的麻醉深度。
　　 3.乳化異氟醚全麻的中樞細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究
　　 (1)麻醉期大鼠大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦突觸體Na+-K

7、+-ATP酶活性降低，恢復(fù)期酶活性趨近麻醉前，酶活性變化與麻醉深度變化呈一致性，表明:大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦突觸體Na+-K+-ATP酶可能參與了乳化異氟醚產(chǎn)生全麻作用的調(diào)控過程。
　　 (2)麻醉期大腦皮質(zhì)、小腦、海馬和丘腦突觸體Ca2+-ATP酶活性受到抑制，恢復(fù)時活性增強(qiáng)，其酶活性變化趨勢與麻醉深度變化一致。表明:表明大腦皮質(zhì)、小腦、海馬、丘腦中突觸體Ca2+-ATP酶可能參與了乳化異氟醚產(chǎn)生全麻作用的調(diào)控過程。
　　

8、 (3)麻醉期大腦皮質(zhì)和海馬突觸體Mg2+-ATP酶活性受到抑制，恢復(fù)期呈上升趨勢，其變化趨勢與麻醉深度變化一致。表明:大腦皮質(zhì)和海馬中Mg2+-ATP酶可能參與了乳化異氟醚產(chǎn)生全麻作用的調(diào)控過程。
　　 (4)麻醉前后大腦皮質(zhì)和海馬中NO含量、NOS活性和cGMP含量變化趨勢一致，并且與大鼠麻醉深度變化具有同步性。表明:大腦皮質(zhì)和海馬中NO-NOS-cGMP信號通路可能參與了乳化異氟醚產(chǎn)生全麻作用的調(diào)控過程。
　　

9、4.乳化異氟醚麻醉對NMDAR2B和nAChRα4表達(dá)的影響
　　 麻醉期，大腦皮質(zhì)層NMDAR2B的陽性細(xì)胞增加，恢復(fù)期陽性細(xì)胞減少至對照組水平;海馬NMDAR2B在麻醉期陽性細(xì)胞減少，恢復(fù)期增加至對照組水平。表明，乳化異氟醚可能是通過誘導(dǎo)大腦皮質(zhì)NMDAR2B表達(dá)和抑制其在海馬中表達(dá)來調(diào)控麻醉過程。NMDAR2B可能是乳化異氟醚全身麻醉作用的靶位之一。
　　 在由麻醉期到恢復(fù)期過程中，nAChRα4在大腦皮質(zhì)層和海馬

10、中陽性細(xì)胞由減少到恢復(fù)至對照組水平，在小腦和腦干中nAChrs陽性細(xì)胞由增加到減少。表明，乳化異氟醚可能是通過誘導(dǎo)nAChrs在大腦皮質(zhì)、海馬中表達(dá)和抑制在小腦和腦干中表達(dá)來調(diào)控麻醉過程，nAChRα4可能是乳化異氟醚全身麻醉作用的靶位點。
　　 5.乳化異氟醚麻醉對c-fos和c-jun基因蛋白表達(dá)的影響
　　 麻醉期，大腦皮質(zhì)、丘腦、海馬和腦干c-fos蛋白表達(dá)均增加，恢復(fù)組各區(qū)c-fos基因蛋白表達(dá)減少至對照組水平

11、，c-fos蛋白表達(dá)量變化與麻醉深度變化一致，表明大腦皮質(zhì)、丘腦、海馬和腦干中c-fos基因參與了麻醉調(diào)控過程，是乳化異氟醚全身麻醉作用的靶基因之一。
　　 麻醉期，小腦、海馬和腦干中c-jun蛋白表達(dá)顯著增加，在恢復(fù)期表達(dá)降低至麻醉前水平，c-jun蛋白表達(dá)量變化與麻醉深度基本一致，表明小腦、海馬和腦干中c-jun基因參與了麻醉調(diào)控過程，是乳化異氟醚全身麻醉作用的靶基因之一.
　　 綜合以上，本實驗證明了乳化異氟醚在小