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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:傳輸型便秘(slow transit constipation, STC)大鼠為動(dòng)物模型,研究疾病狀態(tài)下結(jié)腸AQP3、AQP4的變化,初步探討白術(shù)內(nèi)酯I對(duì)STC的治療作用及作用機(jī)制。
方法:選取40只,7-8周齡,健康清潔級(jí),Wistar大鼠,體重在170-220 g,按照隨機(jī)數(shù)字表法將實(shí)驗(yàn)大鼠分為正常組(10只)和造模組(30只),分組后各組大鼠間體質(zhì)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,參照歷年文獻(xiàn)報(bào)道,給予大黃酸灌胃,建立大鼠慢傳輸型便
2、秘模型。模型復(fù)制成功后,造模組大鼠再次隨機(jī)分為模型組(10只)、白術(shù)內(nèi)酯I組(10只)、莫沙必利組(10只)。各組分別給予相應(yīng)藥物進(jìn)行灌胃治療,記錄大鼠每日糞便性狀及大鼠糞便濕重,采用活性碳灌胃法檢測(cè)結(jié)腸傳輸功能并通過(guò)免疫組化、RT-PCR方法檢測(cè)大鼠結(jié)腸AQP3、AQP4的表達(dá)和分布。
結(jié)果:(1)造模組大鼠Bristol糞便性狀分級(jí)為1-2級(jí),正常組大鼠Bristol糞便性狀分級(jí)為4-5級(jí),與正常組相比,造模組大鼠糞便性狀
3、較干硬;造模前,正常組和造模組大鼠24小時(shí)的糞便濕重?zé)o顯著性差異,(P>0.05),造模后,與正常組相比,造模組大鼠24小時(shí)糞便重量明顯減輕,差異顯著(P<0.05);正常組大鼠碳末推進(jìn)率為87.24±1.34%,造模組大鼠碳末推進(jìn)率為63.58±3.76%,與正常組相比,造模組大鼠碳末推進(jìn)率明顯下降,差異顯著(P<0.05);以上充分表明STC大鼠模型復(fù)制成功。(2)給予藥物干預(yù)后,與正常組比較,模型組大鼠糞便濕重明顯減輕,碳末推進(jìn)率
4、下降,差異顯著(P<0.05);與模型組比較,白術(shù)內(nèi)酯I組、莫沙必利組大鼠糞便濕重增加,碳末推進(jìn)率增加,差異顯著(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯I組及莫沙必利組的大鼠糞便濕重及碳末推進(jìn)率無(wú)顯著性差異(P>0.05)。(3)免疫組化:光鏡下觀察AQP3、AQP4主要表達(dá)于結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞、杯狀細(xì)胞及隱窩細(xì)胞。陽(yáng)性表達(dá)呈棕色或棕褐色。與正常組比較,模型組結(jié)腸上皮細(xì)胞、杯狀細(xì)胞染色更明顯,呈強(qiáng)陽(yáng)性;與模型組比較,白術(shù)內(nèi)酯I組、莫沙必利組部分結(jié)腸上皮
5、細(xì)胞、杯狀細(xì)胞染色,呈陰性或者弱陽(yáng)性;白術(shù)內(nèi)酯I組與莫沙必利組之間無(wú)明顯差異。(4)RT-PCR:與正常組比較,模型組AQP3、AQP4光密度值增加,表達(dá)量增加,差異顯著,(P<0.05);與模型組比較,白術(shù)內(nèi)酯I組及莫沙必利組AQP3、AQP4光密度值下降,表達(dá)量下降,差異顯著,(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯I組與莫沙必利組的AQP3、AQP4表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:(1)模型組STC大鼠結(jié)腸中AQ
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