蘆薈預防與治療慢傳輸型便秘的作用及機制研究.pdf

1、目的：慢傳輸型便秘(slow transit constipation，STC)是臨床常見的消化道病癥。隨著現(xiàn)代人們生活節(jié)奏加快，生活水平提高，飲食結(jié)構(gòu)改變以及社會人口老齡化，STC的患病率呈逐漸上升趨勢，且隨年齡的增長而增加。便秘不僅嚴重影響患者的生存質(zhì)量，還與急性心腦血管疾病、癡呆、結(jié)直腸癌等有著密切的關系。蘆薈中含有豐富的葸醌類化合物、多糖、氨基酸、多種微量元素等有效化學成分，盡管蘆薈用于治療便秘已有悠久的歷史，但對于蘆薈潤腸通便

2、作用的機制研究很少，其促進腸運動的機制目前尚未闡明，尤其是對于調(diào)節(jié)胃腸激素方面，目前尚未見報道?；谝陨蠋c，本課題首先測定蘆薈的有效成分--蘆薈苷的含量，然后用復方地芬諾酯誘發(fā)STC動物模型，用蘆薈進行干預，觀察其預防和治療作用，并在此基礎上研究蘆薈能否改變STC動物模型中胃腸激素的紊亂，探討其發(fā)揮藥理學作用的機制，并為蘆薈進一步應用于預防和治療STC提供理論依據(jù)。 方法 1蘆薈制品中蘆薈苷含量測定采用HPLC分別測定

3、庫拉索蘆薈全葉干粉、精制干粉、全葉凍干粉、全葉噴干粉、純化藥用級干粉及市售復方蘆薈膠囊六種蘆薈制品中蘆薈苷含量。測定條件：ZORBAX SB-18色譜柱(4.6mmxl50mm,5μm)，檢測波長355nm，流動相為乙腈：水(25:75)，流速：1ml/min，外標法測定不同蘆薈制品中蘆薈苷含量。 2蘆薈制品通便功能篩選采用復方地芬諾酯(10mg/kg·bw)誘發(fā)動物便秘模型，給予以上蘆薈制品(1.0g/kg·bw)，觀察各組小

4、鼠首次排黑便時間、6h排便粒數(shù)、糞便性狀、糞便干濕重。 雄性昆明小鼠50只，隨機分為5組，空白對照組、蘆薈低劑量組(0.17g/kg·bw)、蘆薈中劑量組(0.33g/kg·bw)、蘆薈高劑量組(1.0/kg·bw)及陽性對照組西沙必利(2.5mg/kg·bw)，給藥后連續(xù)觀察每只動物首次排黑便時間、6h排便粒數(shù)、糞便濕重，計算糞便含水率。 3.2蘆薈對便秘小鼠排便功能的影響雄性昆明小鼠60只小鼠隨機分為6組，空白對照組

5、、蘆薈低劑量組(0.17g/kg·bw)、蘆薈中劑量組(0.33g/kg·bw)、蘆薈高劑量組(1.Og/kg·bw)、便秘模型對照組和陽性對照組西沙必利(2.5mg/kg·bw)，連續(xù)灌胃7天，第8天便秘模型對照組、陽性對照組和蘆薈低、中、高劑量組給予復方地芬諾酯(5 mg/kg·bw)，空白對照組給予等體積的蒸餾水。給復方地芬諾酯0.5h后，蘆薈低、中、高劑量組及陽性對照組分別給予含受試樣品的指示墨汁、空白和便秘模型對照組只給墨汁。

6、觀察記錄每只動物首次排黑便時間、6h排便粒數(shù)及重量，并計算糞便含水率。 3.3蘆薈對便秘小鼠腸運動功能的影響動物分組及給藥方法同3.2，給予墨汁0.5h后，摘眼球取血，脫臼處死動物，迅速取出整個腸道，計算墨汁推進率，采用硝酸還原酶法測定血清中NO含量。 4蘆薈對大鼠慢傳輸型便秘的預防與治療作用4.1預防作用：48只雄性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、STC模型組、蘆薈小劑量組(0.33g/kg·bw)，蘆薈大劑量組(

7、O.66g/kgobwI)共4組，每組12只。模型組，蘆薈小劑量組及蘆薈大劑量組的大鼠每天給予8 mg/kg·bw的復方地芬諾酯，空白對照組給予同體積蒸餾水；間隔2h后蘆薈小劑量組給予蘆薈混懸液，空白對照組及模型組給予同樣體積的蒸餾水。連續(xù)給藥8周，每兩周測定腸道傳輸速度及糞便稱重。8周后斷頭處死每組8只大鼠用于采集血漿及組織標本，測定血漿及腸組織中胃動素(motilin，MTL)、P物質(zhì)(substance P，SP)、血管活性腸肽(

8、vasoactiveintestinal peptide，VIP)含量，4只大鼠用于病理觀察。 4.2治療作用：48只Wistar大鼠隨機分為空白對照組(12只)、STC模型組(36只)。STC模型組每天給予復方地芬諾酯灌胃，劑量8 mg/kg·bw，灌胃體積0.5ml/100g·bw，空白對照組給予同體積蒸餾水。連續(xù)給藥8周后，停藥l周，測定大鼠的腸道傳輸速度。將STC模型組大鼠隨機分為3組：自然恢復組、蘆薈小劑量組(O.33

9、g/kg·bw)、蘆薈大劑量組(0.66g/kg·bw)，每組12只。自第10周，各蘆薈組分別經(jīng)灌胃給予不同劑量蘆薈，空白對照組及模型恢復組給予同體積蒸餾水，給藥2周后測定大鼠腸道傳輸速度及糞便稱重，8只大鼠用于采集血漿及組織標本，測定血漿及腸組織中胃動素(motilin，MTL)、P物質(zhì)(substance P，SP)、血管活性腸肽(Vasoactive intestinal peptide，VIP)含量，4只大鼠用于病理觀察。

10、 結(jié)果 1蘆薈制品中蘆薈苷含量：庫拉索蘆薈全葉干粉、精制干粉、全葉凍干粉、全葉噴干粉、純化藥用級干粉及市售復方蘆薈膠囊六種蘆薈制品的蘆薈苷含量依次為0.088％、0.266％、0.908％、6.71％、13.97％和3.41％。 2蘆薈精制干粉、蘆薈純化藥用級干粉能夠縮短便秘小鼠的首便時間，增加其所排糞便的粒數(shù)和重量；蘆薈全葉凍干粉能夠縮短便秘小鼠的首便時間，增加其所排糞便重量；蘆薈全葉噴干粉能夠增加排出糞便的重量，蘆

11、薈全葉干粉未見明顯通便作用。蘆薈精制干粉對便秘的效果較好。 3蘆薈對小鼠排便及腸運動功能的影響3.1蘆薈對正常小鼠排便功能的影響高劑量的蘆薈能縮短正常小鼠的排便時間、增加排便粒數(shù)、重量及糞便含水率，對正常小鼠具有潤腸通便作用。 3.2蘆薈對便秘小鼠排便功能的影響與空白對照組相比，便秘模型對照組小鼠的首便時間顯著延長，6h黑便粒數(shù)減少。與便秘模型對照組相比，蘆薈低、中、高劑量組均能不同程度的縮短便秘小鼠的首便時間，增加6h

12、黑便粒數(shù)及糞便干、濕重，并能增加糞便含水率。小鼠排便干、濕重隨著蘆薈濃度的增加而增加，呈現(xiàn)明顯的劑量效應關系。與便秘模型對照組相比較，蘆薈各劑量組小鼠糞便含水率均有顯著增加。陽性對照組小鼠的首便時間明顯縮短，6h黑便粒數(shù)增加，但糞便干、濕重及糞便含水率與模型對照組小鼠相比，無明顯差別。 便秘模型對照組小鼠的墨汁推進率明顯低于空白對照組。蘆薈中、高劑量組均能提高小鼠的小腸墨汁推進率，且蘆薈給藥劑量與小鼠的小腸墨汁推進率成劑量.效應

13、關系，表明蘆薈能增加小鼠的腸推進率，促進腸道運動。便秘模型對照組的NO含量均值比空白對照組升高了64.6％，與便秘模型對照組比較，蘆薈低、中、高劑量組的NO水平分別降低了4.33％、17.00％、21.80％，且高劑量組與便秘模型對照組相比有明顯差異(P<0.05)。相關性分析表明血清NO含量與小腸墨汁推進率呈負相關，F(xiàn)=-0.346(P<0.05)。陽性對照組小鼠血清NO水平與模型對照組小鼠相比，無明顯差別。 4蘆薈對大鼠慢傳

14、輸型便秘的預防與治療作用4.1蘆薈對大鼠慢傳輸型便秘的預防作用及對胃腸激素的影響腸道傳輸功能測定結(jié)果表明，與正常對照組相比，STC模型組的首次排便時間延長，排便粒數(shù)減少，糞便含水率降低，模型成功。與STC模型組相比，蘆薈預防組大鼠首便時間縮短，排便粒數(shù)增加的糞便干、濕重及糞便含水率均增加。 與正常對照組相比，STC模型組大鼠腸組織中MTL含量降低(P<0.05)；與模型組相比，蘆薈大劑量預防組MTL含量升高(P<0.05)，與正

15、常對照組相比，STC模型組大鼠血漿及腸組織中SP含量均降低；與模型組相比，蘆薈小劑量預防組血漿SP含量升高(P<0.05)，蘆薈大劑量預防組血漿及腸組織中SP含量均升高(P<0.01)。 與正常對照組相比，STC模型組大鼠血漿及腸組織中VIP含量均降低(P<0.01)；與模型組相比，蘆薈小劑量組腸組織中的VIP含量升高P<0.05)，蘆薈大劑量組血漿及腸組織中的VIP含量均升高(P<0.05)。 4.2蘆薈對大鼠慢傳輸型

16、便秘的治療作用及對胃腸激素的影響腸道傳輸功能測定結(jié)果表明，與正常對照組相比，STC模型恢復組的首次排便時間延長(P<0.01)，排便粒數(shù)減少(P<0.01)；與STC模型恢復組相比，蘆薈大、小劑量治療組的首便時間縮短，且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 與正常對照組相比，STC模型恢復組大鼠腸組織中MTL含量降低，但差異無統(tǒng)計學意義；與模型組相比，蘆薈大劑量組MTL含量升高(P<0.05)與正常對照組相比，STC模型恢復組大鼠

17、血漿及腸組織中SP含量均降低(P<0.05，P<0.01)；與模型恢復組相比，蘆薈大劑量組血漿及腸組織中SP含量均升高(P<0.01)。 與正常對照組相比，STC模型恢復組大鼠血漿及腸組織中VIP含量均降低，腸組織中的降低具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與模型恢復組相比，蘆薈小劑量和大劑量預防組血漿及腸組織中VIP含量均有升高，其中蘆薈大劑量組腸組織中VIP含量升高具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)結(jié)論1蘆薈制品具有潤腸通便作用，其

18、作用大小可能與加工方式有關，其中蘆薈精制干粉通便作用較好。 2.1.0g/kg·bw的蘆薈對正常小鼠具有潤腸通便作用，而0.17g/kg·bw的蘆薈對便秘小鼠即呈現(xiàn)明顯的潤腸通便作用。 3蘆薈能明顯改善復方地芬諾酯誘導的腸蠕動抑制小鼠的腸道運動功能，并呈劑量效應關系。此作用可能與蘆薈增加糞便含水率、降低血清NO有關。 4蘆薈對復方地芬諾酯誘導的大鼠STC具有一定的預防和治療作用，可能與升高血漿和腸組織MTL、SP