閩西青岡組織培養(yǎng)體系的建立及其機理研究.pdf

1、閩西青岡（Cyclobalanopsis minxiensis）是福建的特有樹種，為殼斗科青岡屬常綠大喬木，對其進行保護、發(fā)展和利用，不僅有利于地區(qū)生態(tài)多樣性的維護，保證植物資源的長久利用，而且對于本地區(qū)的文化傳承還起到積極作用，因此具有重要的現(xiàn)實和社會意義。植物組織培養(yǎng)具有縮短苗木育種周期，實現(xiàn)苗木的快速高效生產(chǎn)和遺傳增益最大化等優(yōu)點。然而木本植物，特別是青岡屬樹種的組織培養(yǎng)，仍然存在諸多難以解決的問題。本論文以閩西青岡優(yōu)良品種幼嫩莖

2、段作為外植體材料，對閩西青岡組織培養(yǎng)過程中各階段的主要影響因素和最佳配方進行研究，并通過內(nèi)源激素的測定探討其中的可能機理，以建立起閩西青岡的組織培養(yǎng)體系，為閩西青岡的規(guī)模化育苗提供一條有效途徑，同時為木本植物，特別是殼斗科樹種的組織培養(yǎng)提供一定的參考經(jīng)驗和理論依據(jù)。本研究的主要結(jié)果如下：
　　（1）以閩西青岡幼嫩莖段作為外植體，接種最佳的滅菌組合為先用0.25 g L-1多菌靈消毒30 min，然后用75％酒精消毒15 s，最后用

3、0.1%HgCl2消毒4 min，此時污染率達到最低26.7%，褐化率達到最低21.1%，成活率也達到最高56.7%。
　　（2）在啟動培養(yǎng)中，以WPM+BA1.0 mg·L-1+NAA0.4 mg·L-1的組合作為誘芽培養(yǎng)基時，外植體的褐化率低，成活率最高，出芽率也達到最高35.6%。在此組合下外植體的促進型內(nèi)源激素ZT、GA3和IAA的含量也最高，抑制型內(nèi)源激素ABA的含量最低。在誘芽的過程中，外植體的ZT、GA3和IAA含量

4、呈上升趨勢，ABA含量則呈下降趨勢。
　　（3）在增殖培養(yǎng)中，WPM+BA0.4 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1的培養(yǎng)基組合是最優(yōu)的增殖誘導方案，此時外植體的增殖分化率達到最高58.3%，增殖系數(shù)也為最大2.05±0.13。外源調(diào)節(jié)劑BA可能在閩西青岡外植體的芽體增殖中起著主導作用。在增殖培養(yǎng)過程中，外植體的ZT、GA3和IAA含量均呈現(xiàn)出逐步增長的態(tài)勢，而ABA的表達平穩(wěn)。
　?。?）在壯苗培養(yǎng)中，在WPM+BA

5、0.05 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1的培養(yǎng)基組合下，組培苗的長勢旺盛，芽苗高大健壯，為最佳方案。在此方案下，GA3的含量顯著提高，說明了莖芽節(jié)間細胞分裂和伸長活躍。壯苗過程中，ZT/GA3和ZT/IAA的比值呈增長態(tài)勢，表明組培苗趨于地上部的生長；GA3/ABA和IAA/ABA的比值同樣呈現(xiàn)上升趨勢，表明組培苗處于生長旺盛的狀態(tài)。
　?。?）在生根培養(yǎng)中，低無機鹽離子濃度的培養(yǎng)基更有利于閩西青岡組培苗的生根誘導，1/

6、2WPM+IBA1.0 mg·L-1是最佳的生根誘導組合，此時組培苗的生根率達到最高的68.9%，且根量多、根系粗長。生根過程中，組培苗的ZT、GA3和IAA含量表現(xiàn)出逐步下降的趨勢，ABA的含量則呈現(xiàn)出持續(xù)增長的趨勢，高濃度的內(nèi)源ABA可能有利于不定根的形成。ZT/GA3的比值呈下降趨勢，印證了該階段根系的生長更為旺盛。GA3/ABA和IAA/ABA比值的下降表明了閩西青岡地上部的生長處于緩慢狀態(tài)，但地下部根系的發(fā)展還是處于比較旺盛的

7、狀態(tài)。
　?。?）移栽時先在常溫下閉瓶煉苗7 d，再開瓶煉苗3 d，選用經(jīng)滅菌處理的草炭土：蛭石=1：1基質(zhì)，先置于室內(nèi)遮陰培養(yǎng)一周，后轉(zhuǎn)到室外蔭蔽處再培養(yǎng)一周，最后再放置于陽光下培養(yǎng)，成活率可達71.11%。
　?。?）在整個組織培養(yǎng)階段中，ZT、GA3和IAA的含量在啟動培養(yǎng)初期到壯苗培養(yǎng)末期的階段中總體呈現(xiàn)出逐步上升趨勢，變化范圍分別為0.53-1.62?g gFW-1、0.63-1.50?g gFW-1和0.53-1

8、.15?g gFW-1；ABA的含量維持在較低的0.35-0.54?g gFW-1范圍，表明了較高水平的ZT、GA3和IAA含量及較低水平的ABA含量有利于閩西青岡外植體地上部的分化和生長。到了生根培養(yǎng)階段，ZT、GA3和IAA的含量分別下降至0.58?g gFW-1、0.74?g gFW-1和0.46?g gFW-1；而ABA的含量增長至1.18?g gFW-1，這表明低水平的ZT、GA3和IAA含量及高水平的ABA含量有助于閩西青岡