金絲桃組織培養(yǎng)體系建立的研究.pdf

1、金絲桃以其絢麗多彩的漿果和豐富多彩的花色,在商業(yè)切花和盆花市場(chǎng)上日益受到消費(fèi)者的喜愛。然而,金絲桃具有分布相對(duì)集中,雜合性高,易受土壤中線蟲危害特征,嚴(yán)重影響了其在生產(chǎn)上的應(yīng)用,使其遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足日益增長的市場(chǎng)需求。金絲桃離體培養(yǎng)和再生體系的建立,不僅開拓了金絲桃快速繁殖的新途徑,而且為金絲桃種質(zhì)資源離體保存,提高育種效率及遺傳轉(zhuǎn)化和創(chuàng)新種質(zhì)資源創(chuàng)新奠定了基礎(chǔ)。
　　 本研究的主要目的是建立一個(gè)有效的金絲桃離體快繁和再生體系,為進(jìn)

2、行下一步的通過遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立提供參考。本試驗(yàn)選取了金絲桃10個(gè)雜交新品種并從微繁,直接再生,間接再生三方面進(jìn)行研究。首先建立了其離體微繁體系,就基因型、培養(yǎng)基類型等因素對(duì)金絲桃微繁體系的影響進(jìn)行了探索；然后進(jìn)一步建立了金絲桃植株直接再生體系,對(duì)不同培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件對(duì)再生條件影響進(jìn)行了比較；最后對(duì)其間接再生體系進(jìn)行了研究,獲得了較好的愈傷組織。本研究主要的研究結(jié)果如下:
　　 1.金絲桃的離體微繁體系的建立
　　

3、金絲桃組培苗分別在1/2MS、B5和MS基本培養(yǎng)基上繼代,生長狀態(tài)最好,其中以觀果金絲桃1號(hào)品種增殖率最高,達(dá)到2.6。最佳生根培養(yǎng)基是:1/2MS+IBA(0.1mg/l),移栽成活率為80％。
　　 2.金絲桃不定芽直接再生體系的建立
　　 以金絲桃1號(hào)、3號(hào)和7號(hào)品種葉片為外植體,研究了不同基因型、濾紙、初期暗培養(yǎng)時(shí)間和植物生長調(diào)節(jié)劑等因素對(duì)不定芽分化和植株再生的影響。結(jié)果表明:1號(hào)品種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+TDZ0.

4、05mg/l+NAA0.01mg/l上黑暗培養(yǎng)20d后再轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng),20d后再生效果最好,達(dá)到36.67％；暗培養(yǎng)時(shí)間過長,易形成愈傷組織而不利于不定芽的分化和植株再生:在培養(yǎng)基表面添加濾紙有利于前期愈傷的形成,從而提高了外植體的再生效率。
　　 3.金絲桃間接再生體系的建立
　　 以金絲桃的莖段和葉片為外植體,探討了愈傷組織誘導(dǎo)及再分化的方法。結(jié)果表明:莖段更容易誘導(dǎo)愈傷,誘導(dǎo)率分別為93.3％；生長素類物質(zhì)以2,4