桃組織培養(yǎng)及遺傳轉化的研究.pdf

1、延長桃貯藏期常采用低溫冷藏,但它易造成桃果冷害,結果并不十分理想.桃貯藏保鮮的現狀表明延長桃貯藏時間、提高貯藏品質,延長貨架期,減少采后腐爛等目標難以靠常規(guī)措施實現.隨著現代生物技術的發(fā)展,植物轉基因技術已得到廣泛應用,國際上番茄轉ACC合成酶和ACC氧化酶反義基因的成功為其他作物解決貯藏難問題提供了范例和良好前景,因此該研究也運用這一思路開展桃組培與轉基因研究.該研究以中國南方主栽品種玉露桃和湖景蜜露桃為試材,建立了桃幼胚和幼胚子葉再

2、生體系,運用基因槍介導法和根癌農桿菌介導法轉化桃幼胚子葉獲得了轉ACO反義基因的轉基因植株,并對轉基因材料進行了分子鑒定.主要研究結果如下:1.以奉化玉露和湖景蜜露桃為試材,分別在盛花后45d和55d采集桃幼果并取其幼胚接種,置于正交設計的16種培養(yǎng)基上,26℃±1℃暗培養(yǎng),研究基本培養(yǎng)基類型、激素等因素對桃幼胚脫分化的影響,篩選出適合愈傷組織分化的激素組合.2.盛花后45d、55d玉露和55d湖景蜜露桃幼胚子葉,置于MS+2％蔗糖+0

3、.75％瓊脂并加入不同濃度配比激素的培養(yǎng)基上,于26℃±1℃,光照強度2000-30001ux,16h/8h光暗周期的環(huán)境下培養(yǎng),研究激素配比、品種、取樣時間、損傷方式對桃子葉再生能力的影響,并對不定芽發(fā)生部位進行了觀察.3.以玉露桃幼胚作為根癌農桿菌介導轉化的受體,通過對GUS基因瞬時表達率的分析,研究此轉化體系的最佳實驗參數.4.通過基因槍轟擊盛花后55d玉露桃幼胚帶胚芽的單瓣子葉轉化帶有桃ACO反義基因的PBI0.8載體,在363