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文檔簡介
1、本研究以不同基因型向日葵的下胚軸為材料,從基因型、培養(yǎng)基、激素種類及濃度等方面探討了向日葵離體培養(yǎng)再生植株的影響因素。在此基礎上,通過根癌農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化技術,以不同基因型下胚軸為受體研究了影響向日葵遺傳轉(zhuǎn)化的條件。 以不同基因型向日葵為材料,進一步研究了向日葵下胚軸在不同的培養(yǎng)基中誘導芽再生的情況。結(jié)果表明,向日葵下胚軸在MS+0.03mg/LIAA+1.2mg/L6-BA的培養(yǎng)基上能夠?qū)崿F(xiàn)較高的不定芽再生。不定芽在1/2MS+
2、1mg/LIBA培養(yǎng)基上能健康成苗。 以NC208、HA300、諾雜212三個基因型向日葵下胚軸為材料,以帶有目的基因Psy的根癌農(nóng)桿菌EHA101進行轉(zhuǎn)化,同時對影響轉(zhuǎn)化的幾個因素進行了研究,并運用PCR及PCR-Southern技術從分子水平上對轉(zhuǎn)基因植株進行了檢測,研究結(jié)果表明:轉(zhuǎn)化受體篩選劑Hyg使用濃度為10mg/L較適宜;共培養(yǎng)時間3d為宜;侵染時間10min為宜;重懸液濃度OD<,600>以0.6為佳;PCR及PC
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