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文檔簡介
1、miRNAs是一種非編碼RNA,能夠通過調控基因表達而參與生長發(fā)育、運動能力和產卵行為等生物學過程。本課題組前期通過神舟八號搭載WT和抗肌肉萎縮蛋白基因(dys-1)缺陷型(cx18)兩種dauer期線蟲,采用生物信息學方法,結合全基因組表達譜的差異基因表達分析發(fā)現(xiàn),cel-miR-52,56和124可能通過其靶基因而參與調控微重力下線蟲的運動和行為變化。因此,本研究針對cel-miR-52,56和124,探討了這三種miRNAs在模擬
2、微重力環(huán)境下是否參與了野生型(WT)和dys-1缺陷型兩類線蟲的運動能力和產卵行為的變化。
本研究首先觀察并證實了dys-1缺陷型線蟲具有頭部過度彎曲的表型特征,與WT相比運動能力和產卵行為無明顯變化。進一步利用qRT-PCR方法測定,發(fā)現(xiàn)miR-52和56的表達在dys-1突變體dauer期表達明顯升高,而在成蟲期并沒有發(fā)生變化,說明miR-52,56可能在dys-1缺陷型的dauer期發(fā)揮其生物學作用。miR-124的表達
3、在dauer期和成蟲期都有顯著性的變化,考慮miR-124的表達發(fā)生的變化可能與dys-1缺失有關,與線蟲的發(fā)育時期無關。
利用3D回旋器進行模擬微重力16.5天,測定了兩類線蟲F0(當代)和F1(子代)的成蟲的運動能力,產卵數和這三種miRNAs及其靶基因的表達情況。結果顯示,模擬微重力導致F0代WT和dys-1缺陷型線蟲的運動能力均明顯減弱,WT更明顯,而F1代WT線蟲的運動能力在微重力處理后仍出現(xiàn)減弱現(xiàn)象,但在缺陷型線蟲
4、中其運動能力已經沒有任何明顯的變化,提示dys-1突變使得線蟲后代對微重力不敏感。模擬微重力引起線蟲miR-52,56和miR-124發(fā)生表達變化,其中miR-52,56可能通過靶基因nep-11和C07H4.1分別在WT和dys-1缺陷型當代線蟲中參與調控微重力下線蟲運動能力的降低變化。C07H4.1基因的變化可能與微重力下WT和dys-1缺陷型F1代線蟲運動能力的變化密切相關,推測其可能參與神經肌肉系統(tǒng)的功能調節(jié)等。WT和dys-1
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