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1、該研究采用PCR方法,從大鼠基因組DNA中擴(kuò)增出了3.6kb的COL1A1基因啟動(dòng)子,并將其克隆到T載體上.采用不同的雙酶切,獲得長(zhǎng)度分別為3.6kb、2.3kb、1.7kb的啟動(dòng)子片段,分別與報(bào)告基因EGFP融合,構(gòu)建三個(gè)真核表達(dá)載體.用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將它們導(dǎo)入到ROS17/2.8細(xì)胞中,通過G418篩選,獲得若干個(gè)穩(wěn)定表達(dá)EGFP的細(xì)胞株.通過細(xì)胞熒光強(qiáng)度半定量分析,顯示報(bào)告基因EGFP表達(dá)差異.細(xì)胞在回轉(zhuǎn)器模擬微重力下培養(yǎng)48小時(shí)后
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