格列吡嗪對小鼠成骨細胞MC3T3-E1增殖、凋亡及COL-1基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　觀察胰島素促泌劑（格列吡嗪）對體外培養(yǎng)的小鼠成骨細胞MC3T3-E1株的增殖、凋亡及COL-1功能基因表達的影響。同時檢測Bcl-2、Bax蛋白的表達，初步探討格列吡嗪對成骨細胞凋亡影響的作用機制。
　　方法：
　　1.實驗方法:以小鼠前體成骨細胞MC3T3-E1為研究對象，將試驗分為4組，分別給予10、20、50μmol/l濃度的格列吡嗪干預，對照組為含相同劑量的DMSO，干預48h后，用CCK-8法檢測

2、細胞增殖活性，Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞術定量檢測細胞早期的凋亡率，Westen blotting方法檢測Bcl-2、Bax蛋白的表達，實時熒光定量PCR法檢測細胞COL-1基因的表達。
　　2.統(tǒng)計學方法:數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（(x)±s）表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析，多組總體比較采用單因素方差分析(One-wayANOVE)，兩兩組間比較采用LSD-t法，對Bcl-2/Bax與細

3、胞凋亡率之間采用Spearman等級相關秩檢驗。檢驗標準P＜0.05。
　　結果：
　　(1)與對照組相比，格列吡嗪干預組成骨細胞增殖活性明顯增強（P＜0.05），細胞增殖活性隨著藥物濃度高而逐漸升高，組間兩兩比較均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。(2)與對照組相比，格列吡嗪干預組成骨細胞早期凋亡率明顯降低(P＜0.05)，且隨藥物濃度增高而逐漸降低，組間兩兩比較具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。(3)與對照組相比，格列吡嗪干預

4、組成骨細胞抗凋亡Bcl-2蛋白表達隨著藥物濃度增高逐漸增加(P＜0.05)，促凋亡Bax蛋白表達隨著藥物濃度增高呈遞減趨勢(P＜0.05)。Bcl-2/Bax蛋白表達強度比與細胞凋亡率呈顯著負相關(n=12，r=-0.923，p＜0.05)(4)與對照組相比，格列吡嗪干預組成骨細胞COL-1功能基因表達明顯上調(P＜0.05);隨著格列吡嗪濃度增高，COL-1基因表達呈上升趨勢，組間兩兩比較均具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。