8-Prenylnaringenin(8-PN)對小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1分化影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 8-Prenylnaringenin(8-PN)是迄今發(fā)現(xiàn)活性最強(qiáng)的植物雌激素,其改善實(shí)驗(yàn)性絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的作用色有報(bào)道,但其具體機(jī)制是否通過影響骨形成或骨吸收仍未闡明。本研究擬觀察8-PN對小鼠成骨細(xì)胞株MC3T3-E1增殖、分化、礦化過程的影響,并從caveolin-1(小凹蛋白-1)角度探討8-PN調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞MC3T3-E1分化過程的機(jī)制,從而試圖從骨形成途徑闡述其治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松機(jī)制。
　　 方

2、法:
　　 將不同濃度8-PN(10-5,10-6,10-7M)分別作用于增殖期MC3T3-E1(第2天)48小時(shí),采用噻唑藍(lán)法(MTT)觀察對成骨細(xì)胞增殖的影響；作用于分化期細(xì)胞(第10、11天)48、72小時(shí),觀察指標(biāo)分別為細(xì)胞裂解液ALP活性(PNPP法)、上清液骨鈣素濃度(EIASA)；對于礦化過程的影響,通過全程加入8-PN,在第28天用茜素紅法觀察礦化結(jié)節(jié)。在分化期采用Western Blotting方法觀察cave

3、olin-1蛋白表達(dá)變化。在上述實(shí)驗(yàn)中,均以雌激素(10-8,10-10M)作為陽性對照進(jìn)行觀察。
　　 結(jié)果:
　　 8-PN不影響成骨細(xì)胞的增殖；8-PN可升高分化期MC3T3-E1細(xì)胞ALP的活性、培養(yǎng)基骨鈣素濃度,有一定劑量依賴關(guān)系；在第28天,8-PN可促進(jìn)成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)的形成。雌激素也呈現(xiàn)相似作用。10-5M8-PN促成骨細(xì)胞效應(yīng)與10-8M雌激素效應(yīng)相仿。8-PN可下調(diào)分化期MC3T3-E1細(xì)胞caveo