GBP5、KLF2基因在潛伏結核感染人群中表達研究.pdf

1、目的：探討 GBP5和 KLF2這兩個目的基因在潛伏結核感染人群中的表達情況，并同時與它們在涂陽結核病患者及健康人群中表達情況進行比較。分析兩種目的基因在三組人群中相對表達量的差異，確定潛伏結核感染(LTBI)人群中將來有可能發(fā)展成為結核病患者的表達閾值。為 LTBI高危人群的篩選找到合適的標志物，以便對這組人群進行精準的化學預防，控制結核病的發(fā)生。
　　方法：在一家綜合醫(yī)院呼吸科和一家結核病專科醫(yī)院兩家單位，共收集180例受試者

2、，分為三組，以痰涂片是否找到結核分枝桿菌（MTB））和γ-干擾素釋放試驗QFT結果為標準，分別為涂陽結核病患者組60例，潛伏結核感染者組（QFT陽性）60例，健康人群組（QFT陰性）60例，對符合條件的受試者，每人抽取外周全血4ml，并給予肝素鋰抗凝處理。然后在兩小時內(nèi)，置于離心機內(nèi)，分離T淋巴細胞，提取 RNA。然后通過反轉錄酶作用，合成 cDNA。再以 cDNA為模板，通過前期合成的引物引導，合成目的基因片段。對合成的目的基因片段采

3、用 RT-PCR技術，進行基因擴增，通過定時定量儀器，測得兩種目的基因的 CT值。用2-△△CT法，對目的基因進行差值校正，求得兩種目的基因 GBP5、KLF2在三組受試者中的相對表達量。通過 SPSS18.0統(tǒng)計分析軟件對 GBP5、KLF2在三組人群的相對表達量數(shù)值進行統(tǒng)計學分析，觀察差異是否有統(tǒng)計學意義。如果統(tǒng)計分析有效，則進一步進行均值的比較，并分別確定兩種目的基因的表達閾值。同時對可能存在的其他情況進行分析比較。
　　結

4、果：1、三組受試者中，GBP5相對表達量差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），GBP5相對表達量，在涂陽結核病患者組中表達最高，在潛伏結核感染人群組中次之，在健康人群組中表達最低。2、三組受試者中，KLF2相對表達量差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），KLF2相對表達量，在涂陽結核病患者組中表達最高，在潛伏結核感染者中次之，在健康人群組組中表達最低。3、對于潛伏結核感染人群中遠期進展為結核病可能性高的群體，上述兩個目的基因表達閾值的界定：GB

5、P5相對表達量在1.17~1.25范圍內(nèi)，未來發(fā)病風險高，是精準預防的對象。KLF2相對表達量在1.11~1.21范圍內(nèi)，未來發(fā)病風險高，是精準預防的對象。4、GBP5、KLF2可以區(qū)別潛伏結核感染與活動性結核病。
　　結論：1、GBP5在三組受試者中相對表達量不同，GBP5可以用來篩選潛伏結核感染人群中遠期進展為結核病可能性高的群體。2、KLF2在三組受試者中相對表達量不同，KLF2可以用來篩選潛伏結核感染人群遠期進展為結核病可