蛋白質(zhì)的多維色譜分離與快速酶解技術(shù)的聯(lián)用研究及應(yīng)用.pdf

1、本文以蛋白的多維色譜-電泳分離-MALDI檢測(cè)方法為主要方向，系統(tǒng)地研究了本工作涉及到的MALDI靶上蛋白快速酶解，色譜或電泳與酶解的兼容，色譜或電泳與MALDI聯(lián)用等問題，最終建立并完善了以“top-down”和“bottom-up”路線特點(diǎn)相結(jié)合的RPLC-CIEF-on-linedigestion-MALDI-TOF-MS蛋白質(zhì)組學(xué)分離分析平臺(tái)。 本文共分四章。主要內(nèi)容摘要如下：第一章為文獻(xiàn)綜述，總結(jié)了蛋白質(zhì)組學(xué)研究現(xiàn)狀

2、及發(fā)展趨勢(shì)。首先詳細(xì)介紹了目前蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的兩大技術(shù)路線“top-down”和“shotgun”的特點(diǎn)和局限性，以及目前正在崛起的“top-down”和“bottom-up”融合技術(shù)路線的特點(diǎn)和重點(diǎn)突破方向；第二章全面的發(fā)展了MALDI靶上蛋白酶解新技術(shù)。第三章提出了建立RPLC-CIEF-MALDI蛋白質(zhì)組學(xué)分離分析平臺(tái)的策略。RPLC和ClEF分離技術(shù)是完全正交的，這樣可以極大提高蛋白分離時(shí)的峰容量和分離效果，此外CIEF是唯一