Ets-1在漿液性卵巢癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:卵巢癌是導(dǎo)致婦女死亡的三大生殖器腫瘤之一，發(fā)病機(jī)制尚不清楚，由于缺乏早期診斷手段，其死亡率居?jì)D科惡性腫瘤首位，是嚴(yán)重威脅女性健康的生殖道惡性腫瘤。探討E26轉(zhuǎn)錄因子-1(E26 transformation-specific-1，Ets-1)在漿液性卵巢癌組織中的表達(dá)及意義，分析Ets-1與漿液性卵巢癌患者臨床病理資料之間的關(guān)系，為卵巢癌這種發(fā)病率高、惡性程度高、死亡例數(shù)高的婦科腫瘤的發(fā)病機(jī)制提供新的理論參考。
　　方法:收

2、集2014年12月至2016年5月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦科住院手術(shù)的漿液性卵巢癌新鮮組織30例、石蠟組織40例，正常卵巢新鮮及石蠟組織各30例。兩組間年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用熒光定量PCR(RT-PCR)方法檢測新鮮組織中Ets-1 mRNA在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)情況，具體操作:提取組織RNA，經(jīng)DNA消化酶Ⅰ處理純化RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，進(jìn)行PCR反應(yīng)，內(nèi)參選用GAPDH;通過蛋白免疫印跡檢測新鮮組織中蛋白表達(dá)情況，步驟為:提

3、取組織蛋白質(zhì)，配制10％的SDS-PAGE凝膠，電泳分離目的蛋白，轉(zhuǎn)膜、脫脂牛奶封閉、Ets-1一抗孵育，4℃過夜，與相應(yīng)二抗結(jié)合，發(fā)光，內(nèi)參選用GAPDH;用免疫組織化學(xué)方法檢測石蠟組織中Ets-1蛋白表達(dá)情況，具體為:連續(xù)切片、梯度脫蠟、枸櫞酸鈉抗原修復(fù)，S-P法順序操作、抗體孵育，DAB顯色、蘇木素復(fù)染、梯度脫水及封片。最后分析Ets-1的表達(dá)與漿液性卵巢癌臨床病理參數(shù)（FIGO分期、淋巴結(jié)、年齡、分級(jí)、CA125水平及腹水量）之

4、間的關(guān)系。
　　結(jié)果:Ets-1蛋白在漿液性卵巢癌石蠟組織中的陽性表達(dá)率(75％)明顯高于正常卵巢石蠟組織(13.3％)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。臨床病理參數(shù)分析發(fā)現(xiàn):Ets-1表達(dá)量與卵巢癌FIGO分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），與患者年齡、分級(jí)、CA125水平及腹水量均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。RT-PCR顯示正常卵巢新鮮組織和漿液性卵巢癌新鮮組織中Ets-1 mRNA在轉(zhuǎn)錄水平相對表達(dá)量分