VEGF和ADAMTS1在不育男性精漿中的表達(dá)及其與精液參數(shù)相關(guān)性分析.pdf

1、背景和目的：
　　不育癥目前已發(fā)展成為了全球性問(wèn)題，世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization,WHO）的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，在不孕不育夫婦中，50％以上存在男方生殖功能缺陷。導(dǎo)致男性不育的因素眾多，其中若僅表現(xiàn)為精液參數(shù)中前向運(yùn)動(dòng)（Progressivemotility,PR）精子的百分率＜32%且病因不明者，稱(chēng)為特發(fā)性弱精子癥（idiopathicasthenospermia）。目前，特發(fā)性弱精子癥的病因研究仍是生

2、殖醫(yī)學(xué)中的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。人類(lèi)精漿中存在多種蛋白酶和細(xì)胞因子，它們對(duì)精子的運(yùn)動(dòng)能力有著一定的調(diào)節(jié)作用。
　　血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）是一種分泌型的糖基化蛋白，由兩個(gè)分子量為17-22KD大小的多肽鏈以二硫鍵的方式連接形成，其分子本身具有高度保守性，對(duì)熱和酸穩(wěn)定。VEGF是人體內(nèi)的一種多功能細(xì)胞因子，能夠強(qiáng)有力地刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增生及血管生成。VEGF在人類(lèi)的生殖系

3、統(tǒng)中，通過(guò)受體介導(dǎo)發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)，促進(jìn)生殖系統(tǒng)中各器官血管的生成，并參與調(diào)節(jié)血管通透性。在大鼠精子的頂體、尾部頸段、中段及主段均發(fā)現(xiàn)了VEGF受體Flt-1和KDR蛋白的表達(dá)，說(shuō)明精子本身即為VEGF的靶細(xì)胞。VEGF在男性精漿中也有一定程度的表達(dá)，且當(dāng)精液中的VEGF水平較高時(shí)，其女方的妊娠率也會(huì)相應(yīng)增加。
　　ADAMTS1（adisintegrin-likeandmetalloproteinasewiththrombosp

4、ondintype1motifs）即含Ι型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶，它是一類(lèi)廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix,ECM）中的Zn2+依賴(lài)的分泌型金屬蛋白酶，它可以通過(guò)降解brevican、versican和aggrecan等蛋白聚糖分子來(lái)參與ECM的重構(gòu)，在人體的卵巢、子宮及泌尿生殖系統(tǒng)中均有不同程度的表達(dá)。ADAMTS1可通過(guò)阻斷VEGF受體磷酸化來(lái)抑制內(nèi)皮增殖和血管新生。同時(shí)，ADAMTS1

5、還可活化基質(zhì)糖蛋白Thrombospondin（TSP），而后者有抗血管再生的作用。Agarwal等人發(fā)現(xiàn)，弱精子癥患者精漿中的ADAMTS1的表達(dá)水平較高于正常男性。S.E.Aydos等人的研究也指出，精子的數(shù)量與活力均與精漿中ADAMTS1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。
　　ADAMTS1的重要功能之一是抑制血管新生，而VEGF是目前體內(nèi)所知的刺激血管新生的最強(qiáng)因子，但兩者的表達(dá)是否相關(guān)，迄今尚不完全明確，基于它們對(duì)男性生殖系統(tǒng)的調(diào)節(jié)都

6、有著重要意義，推測(cè)精漿中VEGF、ADAMTS1表達(dá)水平的改變可能影響了精子活力。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)精漿中VEGF、ADAMTS1的表達(dá)水平，并分別將其與精液參數(shù)和助孕治療結(jié)局進(jìn)行相關(guān)性分析，探討人類(lèi)精漿中VEGF、ADAMTS1的表達(dá)水平對(duì)精子活力的影響。
　　材料與方法：
　　所選取的研究對(duì)象為2015年11月-2016年1月期間在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心就診行首次夫精人工授精（artificalins

7、eminationbyhusband’ssperm,AIH）助孕治療的不育患者。其中，實(shí)驗(yàn)組為36名特發(fā)性弱精子癥患者，正常對(duì)照組為31名精液分析各項(xiàng)參數(shù)正常且既往有生育史的男性，收集新鮮精液，行常規(guī)精液分析后離心沉淀，吸取上層精漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組患者精漿中VEGF、ADAMTS1的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組精漿中VEGF的表達(dá)水平分別為：77.51±12.47pg/ml、147

8、.05±15.26pg/ml，特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組相比較，精漿中VEGF的表達(dá)水平下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　2.特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組精漿中ADAMTS1的表達(dá)水平分別為：92.38±16.77ng/ml、46.87±13.12ng/ml，特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組相比較，精漿中ADAMTS1的表達(dá)水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　3.特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組精漿中VE

9、GF的表達(dá)水平與ADAMTS1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.433,P＜0.01）。
　　4．特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組精漿中VEGF的表達(dá)水平與精液優(yōu)化前的前向運(yùn)動(dòng)精子百分率呈正相關(guān)（r=0.741,P＜0.01）。
　　5.特發(fā)性弱精子癥組與正常對(duì)照組精漿中ADAMTS1的表達(dá)水平與精液優(yōu)化前的前向運(yùn)動(dòng)精子百分率呈負(fù)相關(guān)（r=-0.347,P＜0.01）。
　　6.特發(fā)性弱精子癥組和正常對(duì)照組的臨床妊娠率分別為1

10、1.11%、12.90%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　7.特發(fā)性弱精子癥組和正常對(duì)照組精漿中的VEGF和ADAMTS1的表達(dá)水平與精液優(yōu)化后的前向運(yùn)動(dòng)精子百分率無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05），二者與臨床妊娠率均無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.精子活力與精漿中VEGF、ADAMTS1的表達(dá)水平有關(guān)，特發(fā)性弱精子癥患者精子活力下降與VEGF降低、ADAMTS1升高密切相關(guān)。
　　2.精液