中藥接骨I號超聲透入對骨折愈合過程中BMP-7表達影響的實驗研究.pdf

1、目的:建立新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段骨折的動物模型,觀察中藥超聲透入療法治療橈骨骨折的療效及中藥超聲透入對骨折愈合過程中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7表達的影響。
　　 方法:構(gòu)建84只健康新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段3.0 mm骨缺損的骨折模型,建模成功后將實驗動物隨機分成3組(實驗組、超聲組、對照組,每組各28只);實驗組以含接骨Ⅰ號(主要成分為:紅花、桃紅、桂枝、川芎、乳香、沒藥、元胡、鍛自然銅、續(xù)斷、狗脊等)的自制中藥超聲耦合劑行中藥低強

2、度脈沖超聲透入治療;超聲組每日于骨折部位以普通超聲耦合劑(不含接骨Ⅰ號)行低強度脈沖超聲治療;對照組予以無超聲信號輸出的超聲探頭行假刺激治療。分別于術后3、6、9、12、15天取骨折局部組織行RT-PCR和免疫組織化學檢測,分別從基因和蛋白水平了解各組骨折局部BMP-7的表達差異。術后4、6周經(jīng)耳緣靜脈麻醉后行X線檢查以觀察不同治療方法對骨折愈合的療效差異,然后處死實驗動物以骨折部位為中心截取2.0 cm長橈骨標本制作石蠟組織切片,行H

3、E染色,從組織學角度進一步了解骨折的愈合情況。
　　 結(jié)果: X線片檢查顯示實驗組骨折愈合快于超聲組及對照組,超聲組骨折愈合快于對照組。HE切片所見骨折愈合情況與X線片觀察結(jié)果一致。RT-PCR提示:術后3天,BMP-7灰度值/內(nèi)參β-actin灰度值在實驗組高于對照組(P＜0.05);術后6、9、12天BMP-7 mRNA表達逐漸增強,實驗組均高于超聲組及對照組(P＜0.05),其中在術后6、9、12天實驗組BMP-7表達與對

4、照組差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)、術后12天實驗組與超聲組表達差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01);術后15天對照組呈現(xiàn)下降趨勢。免疫組織化學結(jié)果提示:術后3天起各組BMP-7表達水平逐漸增強,實驗組于術后15天呈現(xiàn)下降趨勢;術后3天,實驗組BMP-7表達強于對照組(P＜0.05);術后第6、9、12、15天實驗組均強于超聲組及對照組(P＜0.05),其中術后9、12天實驗組與對照組表達差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)